МАЗОК КРОВИ: ХАРАКТЕРИСТИКА, ВИДЫ, МЕТОДЫ И ГИСТОЛОГИЯ - БИОЛОГИЯ - 2025

Мазок крови является периферическим мазок крови , который используется для анализа компонентов , присутствующие в кровотоке. Наблюдение за мазком крови дает гематологические данные, которые очень полезны для диагностики и наблюдения за многими патологиями.

Мазок крови позволяет количественно определить количество различных типов лейкоцитов (лейкоцитарная формула), а также позволяет анализировать морфологию и форму эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов.

Подготовка мазка крови. Источник: Кровь в лабораторном стакане. Public DomainPictures.net

В нем могут быть обнаружены отклонения в количестве клеток, такие как: лейкоцитоз или лейкопения, лимфоцитоз или лимфопения, нейтрофилия или нейтропения, тромбоцитоз или тромбоцитопения и эозинофилия. Также могут быть замечены аномалии размера и формы клеток.

Кроме того, можно обнаружить различные типы анемий, лейкозов, бактериальных инфекций или инфекций, вызванных паразитами крови.

Для этого существуют разные виды мазков, которые выполняются в зависимости от цели исследования. Есть тонкие мазки и толстые мазки. Эти мазки различаются техникой выполнения и целью исследования.

Те, у кого есть мелкие капли, используются в качестве дополнения к полному гематологическому анализу. Это предоставляет данные о формуле лейкоцитов, в дополнение к анализу формы и морфологии трех серий клеток, составляющих кровь: красных серий, белых серий и тромбоцитов. Хотя они же служат дополнением к исследованию толстого мазка крови.

Толстая пленка используется для диагностики заболеваний, вызываемых гемопаразитами, таких как малярия или малярия, токсоплазмоз, лейшманиоз, болезнь Шагаса, бабезиоз и микрофиляриоз.

Характеристики мазка крови

Хороший мазок крови должен соответствовать определенным характеристикам. Среди них можно отметить:

- Образец должен соответствовать минимальным требованиям к качеству, чтобы быть представительным.

-Отбор проб должен быть хорошо выполнен.

-Своевременное выполнение мазка.

- Если выполняется с венозной кровью, используйте антикоагулянт, который не деформирует клетки, и перемешайте пробирку перед тем, как делать мазок.

-Если это делается с капиллярной кровью, откажитесь от первой капли.

-Распространение должно быть однородным. Это гарантирует, что клетки распределены равномерно и что клетки крови могут быть хорошо проанализированы на предмет формы и количества.

-Стороны мазка должны быть гладкими от начала до конца.

-Мазок должен иметь запас 1-2 мм по бокам предметного стекла.

- Нанесенный слой должен постепенно уменьшаться по толщине от начала до конца (размазывать мелкие капли методом ползунка).

-Он должен быть правильно маркирован, чтобы избежать путаницы с образцом.

-Фиксируйте и окрашивайте должным образом для четкого наблюдения за элементами крови.

-Дайте мазку хорошо высохнуть, прежде чем помещать препарат под микроскоп. Нанесение иммерсионного масла на влажный мазок вызовет образование мицелл, которые не позволят увидеть клетки.

Виды мазка крови

Мазки периферической крови можно разделить на тонкие и толстые. Те с тонким слоем используются для изучения формулы лейкоцитов и морфологического наблюдения клеток крови. Также можно увидеть внеклеточные бактерии, такие как боррелии, и внутриклеточные гемопаразиты, такие как плазмодий и другие.

В тонкой капле можно идентифицировать вид паразита, поэтому это более специфический метод, чем толстая капля, но толстая капля более чувствительна, поскольку это метод концентрации, используемый для исчерпывающего поиска внеклеточных гемопаразитов.

Есть два типа мазков с мелкими каплями: мазки на предметных стеклах и мазки с покровных стекол. Толстые мазки выполняются на предметных стеклах.

Методы взятия проб крови

Мазки крови могут быть взяты из прокола капилляров или венозного образца, взятого с антикоагулянтом. Если это делается из крови с антикоагулянтом, мазок можно приготовить в течение 2 часов после взятия образца.

С осторожностью следует использовать антикоагулянты, не деформирующие клетки крови. Лучший вариант - ЭДТА. Напротив, следует избегать использования антикоагулянтов, таких как тринатрийцитрат.

Если образец взят капиллярной пункцией, мазок следует расширить немедленно, до образования тромбов.

Первую каплю следует выбросить, позволяя следующей капле ускользнуть самопроизвольно, чтобы избежать разбавления образца тканевой жидкостью. Это наиболее рекомендуемый метод наблюдения за морфологией клеток, поскольку в крови нет никаких добавок.

Для наблюдения за гемопаразитами Солари и др. В своей исследовательской работе пришли к выводу, что оба метода (венепункция и капиллярная) одинаково эффективны.

Виды забора крови: А. Пункция капилляра. Б. Венозная пункция. Источник: A. Flickr.com B. Pxhere.com

Методы приготовления мазка крови

Мазок крови может быть выполнен вручную на предметных стеклах микроскопа или на покровном стекле или предметном стекле. Это также возможно с помощью автоматизированного оборудования.

-Слайды мазки

Это метод, который предпочитают большинство лабораторий из-за простоты использования.

С помощью пипетки Пастера поместите не очень густую или очень мелкую каплю крови в центр одного конца чистого предметного стекла.

Мазок делается с помощью другого предметного стекла с отшлифованным концом. Предметное стекло с матовым стеклом помещают перпендикулярно тому концу, на котором расположена капля.

Он наклоняется под углом 30–45 ° и скользит в сторону падения; При прикосновении он линейно расширяется над краем опоры земли и с постоянным и определенным движением возвращается; не дойдя до конца, слайд поднимается.

Таким образом, однородный слой распределяется по поверхности принимающего предметного стекла.

Мазку дают высохнуть. Затем он фиксируется и окрашивается предпочтительным пятном. Дайте хорошо высохнуть перед просмотром под микроскопом. Капля масла наносится на лицо, показывая мазок, и исследуется под световым микроскопом.

Мазок крови на слайде. Верхнее изображение: неокрашенный мазок. Нижнее изображение: пятнистый мазок. Источник: Coinmac

Части мазка на слайдах

В этом типе мазка можно выделить три определенные области: голова, тело и хвост. Голова соответствует тому участку, где начинается мазок, это самая толстая область, и наблюдать за ней нехорошо.

Тело - это центральная или промежуточная часть мазка, это лучшая область для наблюдения под микроскопом, потому что там клетки равномерно распределены и их морфология сохраняется.

Хвост соответствует последней части мазка; здесь распределение больше не является однородным, и морфология эритроцитов имеет тенденцию к потере.

Контроль качества в слайд-технике

В этой технике он играет фундаментальную роль:

-Очистка и обезжиривание слайда: гарантирует хорошее скольжение образца.

-Размер капли: при очень больших каплях получается более толстый и длинный мазок, при очень маленькой капле растекание будет короче и очень мелким.

-Скорость, применяемая в удлинении: чем ниже скорость, тем тоньше будет мазок, тем выше скорость будет гуще.

-Угол исполнения: чем меньше угол, тем мельче мазок, чем больше угол, тем толще.

-Шаг на покровное стекло

Он не получил широкого распространения, потому что обращение с хрупкими покровными стеклами является обременительным, однако он дает большие преимущества, поскольку достигается лучшее распределение клеток по мазку.

Не очень толстая, не очень мелкая капля помещается в центр покровного стекла. Сразу же поверх него помещается еще одно покровное стекло таким образом, чтобы кончики обоих покровных стекол выступали, образуя звезду.

Капля самопроизвольно растечется по поверхности обоих покровных стекол. В конце расширения каждый слайд быстро сдвигается на противоположные стороны друг друга (один вправо, а другой влево).

Методика дает два мазка вместо одного.

Их кладут для просушки развернутой стороной вверх. После высыхания его фиксируют и окрашивают выбранной техникой. Дайте высохнуть. Капля иммерсионного масла помещается на предметное стекло, мазок помещается стороной с мазком вниз и просматривается под микроскопом.

Контроль качества в технике покровного стекла

Чтобы получить хороший мазок по этой методике, важно:

-Очистка покровных стекол (способствует плавному скольжению образца).

-Размер капли (влияет на толщину мазка).

-Скорость отделения покровных стекол (влияет на однородность покрытия).

-С автоматизированным оборудованием

Их можно сделать с помощью любой из этих команд: Spinner и Autoslide.

Спиннер состоит из помещения предметного стекла с каплей крови на специальную центрифужную пластину. Проба центрифугируется на высоких скоростях; Таким образом образуется однородный и мелкий мазок образца. Его недостатком является возможность гемолиза образца.

Autoslide - это инструмент, который механически выполняет движения для нанесения мазка на слайдах. Также можно исправить и окрасить мазок. Его даже можно адаптировать к некоторым автоматическим гематологическим счетчикам.

Техника толстого мазка

Для поиска гемопаразитов рекомендуется два мазка: один с мелкой каплей, а другой с толстой.

Сделайте капиллярную пункцию, очистите первую каплю. Нанесите мелкую каплю на предметное стекло и смажьте, как описано ранее. Для толстой бусинки поместите большую бусину на другую горку и разложите на квадрат 1,55 мм. Дайте двум мазкам высохнуть.

Окрашивание мазка

Пятна Гимзы или Райта, среди прочего, можно использовать для мелких капель. Для толстых мазков рекомендуется окраска Гимзы или Мая-Грюнвальда Гимза.

Пятно Гимзы

Мазок фиксируют метанолом на 3 минуты, сливают и снова дают высохнуть. Затем мазок покрывают пятном Гимзы на 10-15 минут. Его промывают дистиллированной водой и дают высохнуть. Для наблюдения под микроскопом помещается капля иммерсионного масла.

Пятно Райта

Мазок покрывают пятном Райта на 5 минут. Выбросьте и поместите буферный раствор с pH 6,8 на 6 минут. Продуть препарат до гомогенизации. Промыть дистиллированной водой и дать высохнуть. Наблюдайте под микроскопом.

Виды бракованных мазков

Встречается у обучаемых в технике мелкой капли со слайдами.

Мазки с участками разной толщины (тонкие и толстые с вкраплениями)

Это связано с тем, что выполняемое движение не было постоянным во время распространения, делая остановки и перезапуска.

Очень короткий мазок мазка

У них есть 2 причины: одна из-за того, что наземная опора была поднята до того, как достигла другого конца опоры. В этом случае он очень толстый и короткий.

С другой стороны, если мазок короткий, но тонкий, это потому, что размер капли был очень маленьким.

Мазок с зачесанной областью ближе к концу мазка

У этого есть несколько причин: одна из них заключается в том, что шлифованная кромка неисправна, что давление, оказываемое на принимающую заслонку, увеличивается во время разбрасывания или изношена шлифованная кромка суппорта.

Мазок с образованием вакуолей или четких округлых или эллиптических областей

Они возникают из-за использования жирных мазков (плохо отмытых и обезжиренных).

Очень толстые или очень тонкие мазки

Слишком большие капли будут давать очень толстые мазки от начала до конца, а очень маленькие капли - очень мелкие.

гистология

Клетки крови можно увидеть в мазке крови. Среди них:

-Эритроциты или красные кровяные тельца

Человеческая кровь, эритроциты или красные кровяные тельца и два белых кровяных тельца. Взято и отредактировано с: Viascos. Ваше наблюдение имеет огромное значение. На этом уровне могут быть обнаружены анемии, талассемия, заболевание костного мозга и т. Д.

Количество эритроцитов или красных кровяных телец составляет примерно 5 x 10 ⁶ мм3 у мужчин и 4,5 x 10 ⁶ у женщин. Эритроциты имеют форму двояковогнутых дисков с физиологической бледностью в центре. Их можно увидеть по отдельности (нормальные) или в виде стопок руло (аномальные).

Мазки также показывают пойкилоцитоз (красные кровяные тельца различной формы), анизоцитоз (красные кровяные тельца разных размеров), анизопойкилоцитоз (разные формы и размеры), анизохромию (разные цвета), эритробласты (незрелые красные кровяные тельца), микроцитоз (более мелкие красные кровяные клетки) ) и макроциты (более крупные эритроциты).

Когда у них наблюдается дефицит гемоглобина и усиливается бледность в центре, говорят, что это гипохромия. Когда наблюдается нормальный красный ряд, он будет считаться нормоцитарным и нормохромным.

-Белые клетки крови или лейкоциты

белые кровяные клетки

Нормальный объем составляет от 5000 до 10000 мм ³ . Они изменяются при инфекционных процессах, при аллергии и лейкозе. В мазке крови можно выделить несколько типов, которые описаны ниже.

Сегментированные нейтрофилы

Они составляют 55-65% от общего числа лейкоцитов. Их размер составляет 10-15 мкм. У них есть сегментированное или лопастное ядро, которое принимает различную морфологию, поэтому оно называется полиморфно-ядерным.

У них много нейтрофильных гранул в цитоплазме и некоторые азурофилы. Они увеличиваются при бактериальных инфекциях (нейтрофилия), уменьшаются при вирусных инфекциях (нейтропения).

Могут наблюдаться морфологические аномалии, такие как плеокариоцитоз (гиперсегментированные ядра), дуги (незрелые клетки) или макрополисы (овальные и большие).

Прочие переделки:

-Токсичные грануляции

-Нейтрофилы Псевдо-Пельгера (ядро не имеет долей или они двулопастные).

-Тельца Дёле: темно-синие цитоплазматические включения.

-Повышенная цитоплазматическая базофилия.

-Интрацитоплазматические вакуоли.

-Клеточный пикноз (потеря межъядерных мостиков).

Сегментированные эозинофилы

Они составляют 1-3% от общего количества лейкоцитов. Их размер 9-10 мкм. Они характеризуются наличием большого количества ацидофильных цитоплазматических гранул и небольшого количества азурофилов. Его ядро ​​состоит из двух долек. Их количество увеличивается при аллергии и заболеваниях паразитарного происхождения.

Сегментированные базофилы

Они встречаются крайне редко, составляют 0–1% лейкоцитов. Их размер составляет 10-12 мкм. Ядро обычно нерегулярное по краям и может быть двулопастным, но этого не наблюдается из-за большого количества базофильных грубых грануляций в его цитоплазме. Очень редко можно увидеть базофилию.

Лимфоциты

Это маленькие клетки с базофильной цитоплазмой, с ядром, хорошо очерченным, круглым, с конденсированным хроматином. Ядро охватывает почти всю клетку. Они составляют 26-40% лейкоцитов крови. Они усиливаются при вирусных инфекциях (лимфоцитоз). Видны реактивные лимфоциты.

Моноциты

Клетки крупнее лимфоцитов, с более крупной цитоплазмой и более рыхлыми овальными ядрами хроматина. Их размер составляет 9-12 мкм. Цитоплазма обильная и обычно выглядит бледно-серовато-синей при стандартных методах окрашивания. Среди изменений наблюдаются вакуолизированные моноциты и моноцитоз.

-Platelets

Их размер составляет 1,5–3 мкм. Форма у него круглая или овальная. Нормальное значение колеблется от 150 000 до 350 000 тромбоцитов / мм3. Они могут уменьшаться при некоторых вирусных инфекциях. Они не имеют ядра и окрашены в фиолетовый цвет. В этой серии могут наблюдаться аномалии, такие как макро- или микротромбоциты, тромбоцитоз или тромбоцитопения, а также фрагменты тромбоцитов.

Патологические элементы

Паразиты крови

Гемопаразиты, такие как возбудитель малярии или малярии (паразиты рода Plasmodium), могут быть обнаружены в мазках крови. По этой причине важно, чтобы мазок анализировался вручную, поскольку автоматизированное оборудование не учитывает этот результат.

бактерии

При таких патологиях, как возвратный тиф или болезнь Лайма, может наблюдаться его возбудитель. В данном случае это соответствует спирохетам Borrelia recurrenti и Borrelia burgdorferi в мазке крови.

Незрелые клетки

В тяжелых случаях наблюдаются лейкозы, лейкемоидные реакции и лейкоэритробластическая реакция, среди прочего. При бактериальных инфекциях могут быть небольшие отклонения влево (наличие жуликов). Эритробласты также могут быть замечены при некоторых анемиях.

Ссылки

1. Кровь и кроветворная ткань. Доступно на: sld.cu
2. Гомес А, Касас М. 2014. Ангел. Клиническая лабораторная интерпретация. 8-е издание. От редакции Médica Panamericana.
3. Солари Сото Л., Сото Таразона А., Мендоса Рекена Д., Льянос Счета А. Сравнение плотности паразитов в густой венозной капле крови и акупрессуры при диагностике Malaria vivax. Rev Med Hered 2002; 13 (4): 140-143. Доступно на: scielo.org.
4. Терри Леонард Нельсон, Мендоса Эрнандес Карлос. Актуальность исследования мазка периферической крови у пожилых людей. Medisur 2017; 15 (3): 362-382. Доступно на: scielo.sld
5. Гринспан С. Исследование мазка периферической крови. Продолжение медицинского образования. Доступно на: bvs.hn/RMH