КОНГО КРАСНЫЙ: ХАРАКТЕРИСТИКИ, ПРИГОТОВЛЕНИЕ И ПРИМЕНЕНИЕ - БИОЛОГИЯ - 2025

Конго красный представляет собой азо краситель для белков , образованных путем сочетания соли диазония и активный ароматическое кольцо. Это вещество способно поглощать электромагнитное излучение в видимом спектре, поэтому оно имеет интенсивный цвет.

Он заряжен отрицательно. Следовательно, он имеет сродство к положительно заряженным клеточным компонентам, таким как определенные белковые вещества. Его цвет меняется в зависимости от pH. В этом смысле, если среда кислая (<pH3), цвет будет интенсивным синим. Между pH3 - pH 5,2 это фуксия (зона поворота), а при pH> 5,2 цвет темно-красный.

Обезвоженный коллоидный раствор Конго Красный и Конго Красный. Источник: Pixinio.com и Wikipedia.com.

Это очень универсальное вещество, так как оно имеет множество применений. Он использовался в качестве красителя в текстильной промышленности, а также для клеток и тканей.

Также для создания питательных сред, измеряющих ферментативное действие, в качестве индикатора pH, в качестве контрольного вещества при оценке правильного функционирования спектрофотометров, при исследовании образования биопленок или при диагностике амилоидов.

Точно так же это позволило различать серотипы бактерий и грибов, идентифицируя специфические структуры в их стенке (липополисахариды).

Характеристики конго красного

Это вещество было открыто Бёттигером в 1884 году. Это производное диазония, образованное бис-диазойной кислотой бензидина с нафтионовой кислотой. Молекула конго красного имеет размер 21 Армстронга, а молекулярная масса составляет примерно 8000 г / моль.

Конго красный характеризуется тем, что растворяется в воде и, тем более, в органических растворителях, таких как этанол, образуя коллоидный раствор.

Он имеет сродство к целлюлозе, амилоидной ткани и положительно заряженным клеточным компонентам.

подготовка

Конго Ред готовится в разных концентрациях в зависимости от используемой техники. Большинство используют конго красный в концентрации 1%, 2%, 0,1% и другие.

Например, для приготовления 2% конго красного необходимо взвесить 2 г обезвоженного пищевого красителя и добавить 100 мл дистиллированной воды. Затем его хранят в янтарной бутылке.

Приложения

Как краситель в текстильной промышленности

Какое-то время он широко использовался в текстильной промышленности из-за его фиксации в хлопке, но в настоящее время он не используется, потому что он канцерогенный, а также из-за нестабильности цвета, обесцвечивания при трении.

Определение способности образовывать биопленку

Было показано, что способность микроорганизмов формировать биопленку является фактором вирулентности.

В этом смысле красный краситель Конго используется как метод определения образования биопленок. Конго красный связывается с экзополисахаридами, присутствующими в биопленке. Однако по сравнению с другими методами он менее всего рекомендуется из-за большого количества ложноотрицательных результатов.

В методе используется красный агар Конго, который состоит из кровяного агара в качестве основы, глюкозы (10 г / л) и красного красителя Конго (0,4 г / л). Оцениваемые штаммы высевают в среду и инкубируют в течение 24 часов при 37 ° C, а затем инкубируют в течение 48 часов при комнатной температуре.

Положительный результат теста подтверждается, если наблюдаются кристаллические колонии черного цвета и сухого вида.

Контроль качества спектрофотометров

Чтобы оценить, соответствует ли оборудование для измерения абсорбции или транзакции фотометрическим параметрам, установленным международными правилами, можно использовать простой метод, позволяющий установить, дает ли оборудование результаты в пределах допустимых значений.

Один из методов оценки - использование конго красного на основе изобестической точки.

Изобестическая точка - это длина волны, при которой конго красный излучает одинаковую оптическую плотность независимо от pH, концентрации и температуры. Значение абсорбции фиксировано и может использоваться в качестве справочного материала.

Известно, что теоретическая изобестическая точка конго красного составляет 541 нм. Если полученное значение отличается, известно, что оборудование имеет проблемы с дрейфом длины волны, и его необходимо проверить специализированным техником.

Подготовка питательных сред

Ортис и др. Описывают культуральную среду, приготовленную с красителем Конго красный и карбоксиметилцеллюлозой, называемую агаром КМЦ, для обнаружения штаммов микробов целлюлита; то есть продуценты целлюлазы (эндоглюконы, экзоглюканазы и ß-глюкозидазы).

Эта среда имеет интенсивную окраску. Цвет будет рассеиваться под действием фермента эндоглюканазы, который разрушает структуру карбоксиметилцеллюлозы. Это говорит о положительной реакции.

Уменьшение вязкости и абсорбции позволяет количественно оценить активность фермента. Например, у штаммов Streptomyces sp.

Идентификация микроорганизмов

Конго красный имеет сродство к полисахаридным структурам определенных штаммов, что позволяет идентифицировать эти микроорганизмы. Среди них Escherichia coli и Shigella flexneri.

Чашки с конго-красным агаром также используются для получения характерных колоний, как в случае с Azospirillum sp, который, среди прочего, дает ало-красные колонии.

Пятно клеток и тканей

Одним из наиболее распространенных применений конго красного является его полезность при диагностике амилоидоза. Это странное заболевание заключается во внеклеточном накоплении аномального белка в различных органах. Этот аномальный белок вырабатывается в костном мозге и называется амилоидом.

Конго красный имеет высокое сродство к этому веществу. Это свойство было использовано, чтобы показать его присутствие в гистологических срезах ткани. Конго Ред используется в сочетании с гематоксилином / эозином для этой цели.

Объединение амилоидной ткани и конго красного происходит через неполярные водородные связи между карбоксильными группами и аминогруппой. Амилоидный белок обеспечивает карбоксильные группы (COOH) и конго красный аминогруппу.

Амилоидная ткань окрашивается в различные оттенки от розового до темно-красного, если смотреть под световым микроскопом. В микроскопах с двуполяризованным светом эти препараты наблюдаются с патогномоничным яблочно-зеленым двойным лучепреломлением.

То есть они представляют дихроизм, поскольку амиелоидные волокна анизотропны. Это наблюдение подтверждает диагноз.

Окрашивание тканей конго красным совместимо с другими диагностическими методами, такими как иммуноцитохимические методы, и даже может быть перекрашено.

Как индикатор pH

Свойство противодействовать изменениям pH используется в технике, называемой хромоэндоскопией.

В этой технике используются красители и индикаторы pH, позволяющие выявить определенные патологии. Среди них - использование конго красного, который может выявить ранние очаги рака на слизистой оболочке желудка, и используется в качестве маркера кислотности.

Методика основана на том факте, что красный конго при кислом pH является черным. Поэтому после нанесения раствора конго красного на слизистую желудка будут выбраны области, где есть бледность, для взятия пробы для биопсии, то есть там, где нет продукции кислоты. Это говорит о наличии ракового очага или потере париетальных клеток.

Ссылки

1. "Конго Красное". Википедия, свободная энциклопедия. 8 мая 2019, 12:13 UTC. 16 мая 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ортис М., Урибе Д. Новый метод количественной оценки активности эндоглюканазы на основе комплекса целлюлоза-Конго красный. Оринокия. 2011 июнь; 15 (1): 7-15. Доступно на: scielo.org.
3. Пенья Дж., Уффо О. Производство биопленок в генотипах Staphylococcus aureus, выделенных от мастита крупного рогатого скота на Кубе. Rev Salud Anim. . 2013 Dec; 35 (3): 189-196. Доступно на: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Кожные проявления системного амилоидоза как ключ диагностики: клинический случай. Преподобный медик. Чили. 2012 Apr; 140 (4): 499-502. Доступно на: scielo.
5. Дуймович С., Ахем Р., Сезини С., Мацциотта Д. Спектрофотометры и фотоколориметры. Практическое руководство по обновлению. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (сентябрь-декабрь): Доступно на: redalyc.org
6. Марин Дж., Диас Дж. И Солис Дж. Хромоэндоскопия при инфекции Helicobacter pylori: время реакции? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Физер Л., Физер М. 1985. Органическая химия. От редакции Reverté. Барселона, Испания. Доступно на: books.google.co.ve
8. Мурильо М. Гистологические методы окрашивания тканей. Университет Гвадалахары, Мексика. Доступно на: academia.edu
9. Пайе М. Определение целлюлолитической, лигнинолитической и амилолитической активности актинобактерий, выделенных из ризосферной почвы клевера белого (Trifolium repens). 2012. Pontificia Universidad Javeriana Факультет наук Промышленная микробиология Богота, округ Колумбия Доступно на: repository.javeriana.edu.co
10. Карденас Д., Гарридо М., Бонилла Р. и Балдани В. Выделение и идентификация Azospirillum sp. на гвинейской траве (Panicum maximum Jacq.) из долины Сезар. Пастбища и корма, 2010; 33 (3): 1-8 Доступно на: scielo.