БИОХИМИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ: ВИДЫ, ДЛЯ ЧЕГО ОНИ НУЖНЫ И ЗНАЧЕНИЕ - БИОЛОГИЯ - 2024

Эти биохимические тесты в микробиологии представляют собой набор тестовых химикатов переносятся в микроорганизмах , присутствующие в образце с целью выявления их ; Эти микроорганизмы обычно являются бактериями. Микробиологу доступно большое количество биохимических тестов.

Однако выбор этих тестов основан на предварительных результатах, таких как образец окраски по Граму и признаки роста, которые позволяют отнести бактерии к определенной категории. Биохимические тесты в основном основаны на метаболических свойствах каждого типа бактерий.

Не все бактерии обладают одинаковыми свойствами, поэтому исследуют, обладают ли они каким-либо конкретным ферментом, добавляя субстрат и ожидая реакции. Обычно это определение дается по изменению цвета или pH культуральной среды.

Для надежной идентификации бактерии на уровне вида часто требуется менее 15 биохимических тестов. Проведение большего количества биохимических тестов может повысить уверенность в идентификации.

Большинство этих биохимических тестов проводится на сыворотке или плазме крови. Однако они также могут выполняться с другими биологическими выделениями, такими как моча, спинномозговая жидкость, плевральная жидкость и фекалии, среди прочего.

классификация

Биохимические тесты можно разделить на 3 группы:

универсальный

Это тесты, которые могут быть выполнены на любом образце и которые направляют микробиолога на следующие биохимические тесты, которые необходимо выполнить для получения надежной идентификации.

пример

Каталазно-оксидазный тест.

Дифференциалы

Это тесты, проводимые для выявления микроорганизмов, присутствующих в образце, вплоть до видового уровня.

Идентификация производится по результатам комбинации тестов, поскольку отдельные результаты недостаточно информативны для идентификации.

пример

Тесты IMViC и тесты на утилизацию сахара.

Конкретный

Это специальные тесты для определенного набора видов или для подтипа видов. Эти тесты обычно проводятся для подтверждения или идентификации на уровне подвидов. Отдельные тесты сами по себе информативны.

пример

Тест на γ-глутамиламинопептидазу.

Виды биохимических тестов

Каталазный тест

Тест на каталазу - это тест, демонстрирующий присутствие фермента каталазы путем разложения перекиси водорода на кислород и воду. К капле перекиси водорода (3%) на предметном стекле добавляется небольшое количество бактерий.

Тест на каталазу - это простой тест, используемый микробиологами для определения видов бактерий и определения способности некоторых микробов расщеплять перекись водорода путем выработки фермента каталазы.

Если наблюдаются пузырьки кислорода, это означает, что у бактерий есть фермент каталаза, потому что он катализирует разложение перекиси водорода на кислород и воду. В таком случае считается, что организм является каталазоположительным (например, Staphylococcus aureus).

Оксидазный тест

Этот тест используется для идентификации микроорганизмов, содержащих фермент цитохромоксидазу (важный в цепи переноса электронов). Он обычно используется для различения семейств Enterobacteriaceae и Pseudomadaceae.

Цитохромоксидаза переносит электроны из цепи переноса электронов на кислород (конечный акцептор электронов) и восстанавливает его до воды. В оксидазном тесте используются искусственные донорные и акцепторные молекулы электронов.

Когда донор электронов окисляется под действием цитохромоксидазы, среда становится темно-фиолетовой и считается положительным результатом. Микроорганизм Pseudomonas aeruginosa является примером оксидазоположительной бактерии.

Тест с соленым маннитоловым агаром (MSA)

Этот тип теста бывает как выборочным, так и дифференциальным. MSA выберет организмы, способные жить в среде с высокой концентрацией соли, такие как виды стафилококков, в отличие от видов стрептококков, рост которых в этих условиях подавляется.

Дифференциальный компонент в этом тесте - сахар маннит. Организмы, способные использовать маннит в качестве источника пищи, будут производить побочные продукты ферментации, которые являются кислыми и, таким образом, понижают pH среды.

Из-за кислотности среды индикатор pH, феноловый красный, становится желтым. Примерами видов бактерий, которые можно дифференцировать с помощью этого метода, являются: Staphylococcus aureus (положительный результат, потому что он ферментирует маннит) и Staphylococcus epidermidis (отрицательный результат, поскольку он не ферментирует маннит).

Коагулазный тест

Коагулаза - это фермент, который способствует свертыванию плазмы крови. Этот тест проводится на грамположительных и каталазоположительных бактериях для выявления золотистого стафилококка (положительный коагулаза). Фактически, коагулаза является фактором вирулентности этого вида бактерий.

Образование сгустка вокруг инфекции, вызванной этой бактерией, вероятно, защищает ее от фагоцитоза. Этот тест очень полезен, если вы хотите дифференцировать золотистый стафилококк от других видов стафилококков, которые отрицательны на коагулазу.

Тест на уреазу

Этот тест используется для выявления бактерий, способных гидролизовать мочевину с помощью фермента уреазы. Его обычно используют для отличия рода Proteus от других кишечных бактерий.

При гидролизе мочевины одним из продуктов является аммиак. Это слабое основание увеличивает pH среды выше 8,4, и индикатор pH (феноловый красный) изменяется с желтого на розовый. Примером уреазоположительных бактерий является Proteus mirabilis.

Для чего нужны биохимические тесты?

Биохимические тесты в микробиологии используются для диагностики заболеваний, вызванных микробами, и для мониторинга лечения, применяемого для борьбы с ними. Кроме того, они используются для выявления инфекционных заболеваний и их прогноза.

Биохимическая идентификация микроорганизмов дает представление о том, что эти микроорганизмы способны делать, будучи возможной дискриминацией различных штаммов одного и того же вида по определенным биохимическим профилям.

Различия в активности конкретных ферментов определяют экологию, физиологию или естественную среду обитания микроорганизмов, что в некоторых случаях может считаться важной информацией.

значение

Структурные различия в форме, размере и расположении бактерий мало помогают в процессе идентификации, потому что существует множество видов бактерий, похожих по форме, размеру и расположению.

По этой причине идентификация бактерий в конечном итоге основана в первую очередь на различиях в их биохимической активности.

У каждого вида бактерий есть четко определенный набор метаболической активности, отличный от всех других видов. Эти биохимические «отпечатки пальцев» - это свойства, контролируемые бактериальными ферментами.

Таким образом, биохимические тесты важны, потому что они помогают исследователю правильно идентифицировать патогены, присутствующие в образце, и, таким образом, иметь возможность рекомендовать соответствующее лечение пациенту.

Ссылки

1. Беккет, Г., Уокер, С. и Рэй, П. (2010). Клиническая биохимия (8-е изд.). Wiley-Blackwell.
2. Кларк, PH, и Коуэн, ST (1952). Биохимические методы бактериологии. Журнал общей микробиологии, 6 (1952), 187–197.
3. Гоу, А., Мерфи, М., Шривастава, Р., Коуэн, Р., Сент, Д. и О'Рейли, Дж. (2013). Клиническая биохимия (5-е изд.). Elsevier Health Sciences.
4. Гольдман, Э. и Грин, Л. (2008). Практическое руководство по микробиологии (2-е изд.). CRC Press.
5. Харриган, В. (1998). Лабораторные методы в пищевой микробиологии (3-е изд.). Академическая пресса.
6. Васантакумари, Р. (2009). Практическая микробиология. BI Publications Pvt Ltd.