ТИМОЛФТАЛЕИН: ХАРАКТЕРИСТИКИ, ПОДГОТОВКА И ПРИМЕНЕНИЕ - БИОЛОГИЯ - 2025

Тимолфталеин является показателем рН с на научное название: 3,3-бис -изобензофуранон -1 (3H) и его химической формулой представляет собой С ₂₈ Н ₃₀ O ₄ . Он синтезируется из фталевого ангидрида и тимола.

Этот индикатор pH имеет очень необычные свойства, так как при крайне низком pH он имеет интенсивный красный цвет (pH <0). Впоследствии существует широкий диапазон pH, при котором он полностью бесцветен (pH 1 - 9,2), с диапазоном изменения от 9,3 до 10,5, где он может измениться на синий, а выше 10,5 - синий. интенсивный.

Химическая структура тимолфталеина при кислом pH (бесцветный) и щелочном pH (темно-синий). Источник: Dannybalanta /Pxhere.com

Его применение включает функцию кислотно-основного индикатора в определенных химических реакциях. Он также используется в качестве хромогена в некоторых колориметрических реакциях, где оценивается ферментативная активность. Например, при определении щелочной фосфатазы.

Что касается токсичности, он менее вреден, чем другие индикаторы pH, и классифицируется Национальной ассоциацией противопожарной защиты (NFPA) как уровень 1 в отношении его воздействия на здоровье; что означает, что он не канцерогенный или мутагенный.

Он также не обладает специфической токсичностью в отношении какого-либо органа-мишени; то есть представляет собой низкий риск агрессии для здоровья. Однако прямой контакт с кожей и слизистыми оболочками может вызвать легкое раздражение.

С другой стороны, с точки зрения воспламеняемости он классифицируется как 1, а с точки зрения реактивности как нулевой.

характеристики

Индикатор pH тимолфталеин в твердой форме представляет собой белый порошок, в жидком состоянии он имеет интенсивный красный цвет при pH менее нуля, бесцветный при pH 1-9,2 и синий при значении pH выше 10,5. Его молярная масса составляет 430,54 г / моль, с температурой плавления (258 ° C), а температура кипения находится в диапазоне 248-252 ° C. Плотность 0,92 г / мл при 25 ° C.

Он не растворим в холодной воде и растворим в этаноле. Это не взрывоопасное вещество.

В качестве меры предосторожности при транспортировке, хранении и обращении следует избегать контакта с сильными окислителями.

подготовка

Индикатор pH тимолфталеин в концентрации 0,1% обычно используется для объемного анализа. Для этого действуйте следующим образом:

- Взвесить 100 мг тимолфталеина и растворить в 100 мл 95% этилового спирта.

Также его можно приготовить следующим образом:

- Взвесить 100 мг тимолфталеина и растворить в 60 мл абсолютного спирта и добавить 40 мл дистиллированной воды.

- Хранить при комнатной температуре (15-25 ° C). Важно, чтобы место хранения было прохладным, вентилируемым и не влажным.

Приложения

Определение щелочной фосфатазы

Для определения этого теста существует методика, основанная на гидролитическом действии щелочной фосфатазы на тимолфталеинмонофосфат. Если присутствует щелочная фосфатаза, она будет гидролизовать монофосфат тимолфталеина, высвобождая тимолталеин.

Это дает синий оттенок при щелочном pH. Ферментативная активность щелочной фосфатазы прямо пропорциональна интенсивности образовавшейся окраски. Поглощение считывают при 590 нм.

Определение антигена простаты (ПСА)

В этом смысле Шао Ф и сотрудники в 2018 году разработали колориметрическую технику, в которой они используют мезопористые наночастицы кремнезема, которые захватывают молекулы тимолфталеина, которые прочно связаны присутствием фенилтриметилоксисилана.

В свою очередь, эти наночастицы были покрыты полиэтиленимином (PEI), что способствует связыванию вторичных антител против PSA.

С другой стороны, образец пациента был иммобилизован на пластине; и когда присутствующий PSA контактирует с наночастицами, он связывается с антителами. Несвязывающиеся наночастицы будут удалены.

Впоследствии тимолфталеин будет легко высвобождаться при добавлении щелочного раствора, который дает синий оттенок. Степень окраски прямо пропорциональна концентрации ПСА.

Определение активности фермента аргининкиназы или фосфокиназы

Используя индикатор pH тимолфталеин, можно определить ферментативную активность аргининкиназы. Тест основан на следующем:

Фермент аргининкиназа представляет собой фосфотрансферазу, которая участвует в образовании фосфоаргинина, что выявлено в следующей химической реакции:

Источник: «Аргининкиназа». Википедия, свободная энциклопедия. 10 июл 2018, 13:49 UTC. 20 мая 2019, 03:58 wikipedia.org/

Если эту реакцию проводят против тимолфталеина, индикатора pH, можно измерить активность фермента. Это возможно согласно следующему объяснению: реакция происходит при щелочном pH, когда тимолфталеин будет иметь синий цвет.

Ферментативная активность измеряется по обесцвечиванию цвета, отраженному уменьшением оптической плотности при 575 нм, поскольку под действием фермента высвобождаются протоны (H +), которые подкисляют среду.

Это приводит к потере цвета тимолфталеина, когда он приближается к зоне поворота. Если pH падает ниже 9,2, он становится полностью бесцветным.

Следовательно, интенсивность синего цвета обратно пропорциональна активности фермента.

Токсичность

В человеческом

Это соединение менее токсично, чем большинство индикаторов pH, поскольку до сих пор ему не приписывали канцерогенного или мутагенного воздействия. Однако это не совсем безвредно: при контакте с кожей и слизистыми оболочками может вызвать покраснение в указанных областях.

Он также может вызывать нежелательные реакции при случайном проглатывании или вдыхании.

В случае прямого попадания на кожу и слизистые оболочки пораженный участок следует промыть большим количеством воды не менее 15 минут. А если они заметят признаки раздражения, им следует обратиться в ближайшую поликлинику.

Вот почему при работе рекомендуется использовать защитные приспособления, такие как халат, перчатки и защитные очки.

Несмотря на низкий риск воспламенения, рекомендуется из соображений осторожности держаться подальше от зажигалок.

Влияние на окружающую среду

Несмотря на то, что он менее токсичен для здоровья человека, он токсичен в водной среде, влияя на находящиеся там организмы. Кроме того, он обладает высокой способностью к биоаккумуляции, и в долгосрочной перспективе возможно образование продуктов разложения, вредных для окружающей среды.

Поэтому следует избегать попадания этого продукта в поверхностные или подземные воды, так как он может повлиять на питьевую воду.

В этом смысле лаборатории, использующие этот индикатор, должны утилизировать свои отходы в соответствии с правилами, действующими в каждой стране.

Ссылки

1. Пиццани П., Годой С., Леон М., Руэда Е., Кастаньеда М., Ариас А. Влияние увеличения концентрации фитофосфора на активность ферментов фитазы и щелочной фосфатазы в эпителии кишечника молодых овец. Преподобный Cient. (Маракайбо). 2008. 18 (1): 59-64. Доступно на: scielo.org.
2. «Тимолфталеин». Википедия, свободная энциклопедия. 22 фев 2019, 04:40 UTC. 19 мая 2019 г., 22:20, es.wikipedia.org.
3. Шао Ф., Чжан Л., Цзяо Л., Ван Х, Мяо Л., Ли Х, Чжоу Ф. Иммуноферментный анализ простатоспецифического антигена, усиленного высвобождением молекул индикатора pH, заключенных в мезопористых наночастицах кремнезема. Anal Chem.2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
4. Ю З, Пан Дж, Чжоу Х.М. Прямой непрерывный pH-спектрофотометрический анализ активности аргинин киназы. Protein Pept Lett. 2002; 9 (6): 545-52.
5. Шарлау. Паспорт безопасности тимолфталеина. 2013. Доступно на: javeriana.edu.co.
6. Паспорт безопасности тимолфталеина. MSDS. Национальный университет Эредиа, Коста-Рика. Доступно в: Тимолфталеин% 20 (3).
7. «Аргининкиназа». Википедия, свободная энциклопедия. 10 июл 2018, 13:49 UTC. 20 мая 2019 года, 03:58 en.wikipedia.org.