- Красители, используемые при простом окрашивании
- 6 шагов к простому окрашиванию
- Шаг 1
- Наблюдение
- Шаг 2
- наблюдение
- Шаг 3
- Шаг 4
- наблюдение
- Шаг 5
- Ссылки
Одного окрашивания является окрашивание процедуры быстрой и простой , в котором используются единственный краситель, поэтому его называют просто. Он в основном используется для определения морфологии и организации клеток, присутствующих в образце.
Клетки по своей природе бесцветны, поэтому необходимо сделать их видимыми при просмотре под микроскопом.

Клетки щек человека, окрашенные простым окрашиванием метиленовым синим.
Важно подчеркнуть, что красители, используемые при простом окрашивании, должны быть основными с положительным зарядом (катионными), чтобы они могли спонтанно связываться с клеточной стенкой и цитоплазмой.
Эти клеточные структуры заряжены отрицательно. Вот почему положительно заряженный краситель притягивается к клеткам и спонтанно связывается с ними. Таким образом, все клетки, присутствующие в образце, быстро окрашиваются.
Красители, используемые при простом окрашивании
Есть несколько основных красителей, которые можно использовать в микробиологической лаборатории. Наиболее часто используются:
- Метиленовый синий.
- Кристально-фиолетовый.
- Малахитовый зеленый.
- Базовый фуксин.
Все эти красители хорошо работают с бактериями, потому что они имеют положительно заряженные (катионные) цветные ионы (хромофоры).
Время окрашивания большинства этих пятен относительно короткое. Обычно они варьируются от 30 секунд до 2 минут, в зависимости от сродства красителя.
Важно иметь в виду, что перед окрашиванием образца простым окрашиванием его необходимо удлинить и закрепить на предметном стекле (предметном стекле); расширенный и фиксированный образец называется мазком.
6 шагов к простому окрашиванию
Шаг 1
Поместите предметное стекло на стойку для окрашивания и нанесите желаемое пятно. Пусть действует соответствующее время.
Обычно простое окрашивание занимает от нескольких секунд до пары минут, в зависимости от используемого красителя.
Наблюдение
На этом этапе важно не превышать рекомендуемое время для используемого красителя, поскольку на листе могут образовываться кристаллы, производящие так называемые «артефакты», искажающие морфологию клеток.
Шаг 2
Тщательно промойте мазок с предметного стекла дистиллированной водой из бутылки или также медленно проточной водопроводной водой, пока сток не станет прозрачным. Обычно это занимает 5-10 секунд.
наблюдение
Не наносите струю воды прямо на мазок, чтобы не повредить образец.
Если у вас нет дистиллированной воды, вы можете без проблем использовать водопроводную воду, поскольку она не повлияет на результат окрашивания.
Шаг 3
Промокните предметное стекло впитывающими бумажными полотенцами в одном направлении и не теряя. Убедитесь, что нижняя сторона слайда чистая.
Шаг 4
Понаблюдайте за окрашенным мазком под микроскопом. Начните с самых отдаленных целей, чтобы правильно определить область, которую вы хотите наблюдать более подробно. Измените объектив, чтобы приближаться к образцу.
наблюдение
Для использования объектива с большим увеличением (обычно 100X) следует использовать иммерсионное масло, так как это помогает лучу проникать свету и делает изображение более резким. Не нужно использовать покровное стекло.
Шаг 5
Наконец, утилизируйте все образцы в соответствующий контейнер, который должным образом помечен как «биологическая опасность».
Ссылки
- (2001). Микробиологические приложения: лабораторное руководство по общей микробиологии (8- е изд.). Компании McGraw-Hill.
- Хариша, С. (2006). Введение в практическую биотехнологию (1- е ). Брандмауэр Media.
- Мойес, Р. Б., Рейнольдс, Дж., И Брейквелл, Д. П. (2009). Предварительное окрашивание бактерий: Простые пятна. Текущие протоколы в микробиологии, (ПРИЛОЖЕНИЕ 15), 1–5.
- Поммервилл, Дж. (2013). Лаборатория основ микробиологии Алькамо (10- е ). Джонс и Бартлетт Обучение.
- Прескотт, Х. (2002). Лабораторные занятия по микробиологии (5- е ). Компании McGraw-Hill.
- Сумбали Г. и Мехротра Р. (2009). Основы микробиологии (1- й ). Тата МакГроу-Хилл Образование.
