АНТИСТРЕПТОЛИЗИН O: КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ, ОБОСНОВАНИЕ, МЕТОДИКА, ПАТОЛОГИИ - БИОЛОГИЯ - 2025

O КРМ будет антитела , генерированные в ответ на инфекцию , вызванной Streptococcus Пирролидонилпептидазы, также известную как стрептококк бета-гемолитический A. Этой группа производит два экзотоксинов с гемолитической называют активности стрептолизина «S» и «O» ,

Стрептолизин S отвечает за бета-гемолиз, происходящий в кровяном агаре, и, хотя он токсичен для определенных клеток иммунной системы, он не является антигенным. В то время как стрептолизин O, лабильный по отношению к кислороду, отвечает за гемолиз, который происходит под кровяным агаром, и он является антигенным.

Streptococcus pyogenes / Схема того, что происходит в тесте ASTO (реакция агглютинации). (Антитела, связанные с частицами латекса, содержащими специфический антиген). Источник: Пользователь: Graham Beards / Alejandro Porto

Таким образом, когда клетки иммунной системы взаимодействуют со стрептолизином O, возникает специфический иммунный ответ, который вызывает активацию B-лимфоцитов. Эти клетки вырабатывают антитела, направленные против стрептолизина O. Поэтому антитела называют антистрептолизин О.

Streptococcus pyogenes вызывает различные патологии, среди которых: тонзиллит, рожа, импетиго, послеродовая лихорадка, скарлатина и сепсис. Антитела к стрептолизину О появляются через 8–30 дней после начала инфекции.

Большинство из этих инфекций очень распространены среди населения, поэтому у людей обычно есть антитела к антистрептолизину O в крови. Низкие титры указывают на прошлое заражение этой бактерией, но высокие или растущие титры указывают на недавнюю или продолжающуюся инфекцию.

Количественное определение антител к антистрептолизину O

В лаборатории титр антител к стрептолизину «О» можно измерить с помощью серологического теста. Тест на антистрептолизин О (ASTO) основан на реакции агглютинации с латексом.

Это можно сделать полуколичественно, с помощью кросс-тестов или количественно определить титр. Это нормально и не имеет значения, чтобы найти значения до 200 МЕ / мл или единиц Тодда / мл. Выше этого значения считается положительным и клинически значимым.

Этот тест не требует от пациента голодания. В качестве образца используется сыворотка, то есть кровь пациента берется и помещается в пробирку без антикоагулянта, а затем центрифугируется для получения сыворотки.

Основа методики ASTO

В этом методе частицы латекса используются в качестве поддержки для фиксации антигена стрептолизина О. Абсорбированные частицы антигена вступают в реакцию с сывороткой пациента. Если у пациента есть антитела к антистрептолизину O, они будут связываться с антигеном, прикрепленным к латексной частице.

Это связывание вызывает агглютинацию, которая видна макроскопически. Интенсивность реакции прямо пропорциональна концентрации присутствующих антител.

методы

- Полуколичественный метод

Интенсивность реакции можно определить полуколичественно крестиками. Для этого берется планшет с серологической реакцией и помещается:

50 мкл сыворотки и 50 мкл реагента ASTO. Хорошо перемешайте деревянной зубочисткой и поместите в автоматический миксер на 2 минуты. Обратите внимание. Если автоматический ротатор недоступен, это необходимо сделать вручную.

интерпретация

Подвеска без комков (равномерная): отрицательная

1. + = слабая реакция

2. ++ = небольшая реакция

3. +++ = умеренная реакция

4. ++++ = сильная реакция

Можно количественно оценить сыворотки, положительные при 3 и 4 скрещиваниях.

- Количественная методика

Для количественного определения титра производятся серийные разведения 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Для этого поступают следующим образом: берутся 4 пробирки или пробирки Кана и на все помещается 0,5 мл физиологического раствора. Затем в первую пробирку добавляют 0,5 мл сыворотки пациента. Хорошо смешивается. Эта пробирка соответствует разведению 1: 2.

Затем 0,5 мл переносят в пробирку 2 и хорошо перемешивают. Эта пробирка соответствует разбавлению 1: 4 и так далее, пока не будет достигнуто желаемое разбавление.

Возьмите 50 мкл каждого разведения и прореагируйте с 50 мкл реагента ASTO на планшете для агглютинации, как описано в полуколичественном методе.

интерпретация

Учитывается максимальное разбавление, при котором наблюдается видимая агглютинация. Расчеты производятся следующим образом:

ASTO = величина, обратная наибольшему положительному разведению x чувствительность метода (константа).

Пример: Пациент с положительной реакцией до 1: 8.

ASTO = 8 x 200 МЕ / мл = 1600 МЕ / мл или единиц Тодда / мл.

Исходная величина

Нормальный взрослый: до 200 МЕ / мл

Нормальные дети: до 400 МЕ / мл.

рекомендации

Рекомендуется проводить с пациентами положительный и отрицательный контроль, чтобы гарантировать, что реагент находится в оптимальном состоянии. Если положительный контроль не агглютинирует или отрицательный контроль агглютинирует, реагент использовать нельзя.

Реакцию необходимо интерпретировать через 2 минуты, по истечении этого времени она недействительна, если есть агглютинация. Это ложные срабатывания.

Гиперлипемическая сыворотка мешает реакции. Они могут давать ложные срабатывания.

Изолированное значение ASTO не очень помогает. Это должно сопровождаться симптомами.

Кроме того, рекомендуется выполнить как минимум 2 измерения ASTO при подозрении на ревматизм или постстрептококковый гломерулонефрит, чтобы продемонстрировать повышение уровня антистрептолизина O и, таким образом, подтвердить диагноз.

Патологии с высокими титрами антистрептолизина О

Антитела к стрептолизину повышаются после перенесения инфекции Streptococcus pyogenes или ß-гемолитическим Streptococcus группы А.

Среди них: острый фарингит, скарлатина, импетиго, рожа, послеродовой лихорадка и сепсис.

У некоторых пациентов, перенесших недавнюю или рецидивирующую стрептококковую инфекцию, могут развиться аутоиммунные заболевания как следствие или осложнение постстрептококковой инфекции, например острый гломерулонефрит и ревматическая лихорадка.

Постстрептококковые аутоиммунные заболевания

Ревматическая лихорадка

Это воспалительное осложнение или осложнение, которое может появиться через 1–5 недель после стрептококковой инфекции. Титры антистрептолизина O значительно увеличиваются через 4–5 недель после начала заболевания.

Высокий титр ASTO указывает на диагноз, но не связан с тяжестью заболевания, и его снижение не означает улучшения.

Антитела к антистрептолизину O перекрестно реагируют на коллаген и мышечные волокна, поражая определенные органы (среди прочего, сердце, кожу, суставы и нервную систему).

Это осложнение или последствия возникают при поражении сердца, лихорадке, недомогании, негнойном миграционном полиартрите, хореи и т. Д.

Острый гломерулонефрит

Острый гломерулонефрит - это негнойное осложнение, которое возникает из-за отложения комплексов антиген-антитело на базальной мембране клубочков.

Образование и циркуляция комплексов антиген-антитело (ag-ac), вызванных стрептококковыми инфекциями, может привести к экссудативным изменениям и воспалению клубочков с протеинурией и гематурией.

Эти комплексы ag-ac откладываются в клубочках и активируют каскад комплемента, что приводит к повреждению эндотелия клубочков. По этой причине это считается аутоиммунным заболеванием, так как иммунная система человека повреждает его собственные ткани.

Антитела к антистрептолизину O очень высокие, а уровни комплемента низкие.

Ссылки

1. Винерские лаборатории. Латекс ASO. 2000. Доступно на: wiener-lab.com.ar
2. Авторы Википедии. «Антистрептолизин О.» Википедия, свободная энциклопедия. Википедия, Бесплатная энциклопедия, 23 января 2019 г., Web. 19 июл.2019.
3. Котби А., Хабиб Н., Эзз С. Титр антистрептолизина O при здоровье и болезни: уровни и значение. Педиатр Rep. 2012; 4 (1): e8. Доступно на: ncbi.nlm.nih
4. Сен Э, Раманан А. Как использовать титр антистрептолизина O. Arch Dis Child Educ Practical Ed.2014; 99 (6): 231-8. Доступно на: ncbi.nlm.nih
5. Конеман Э, Аллен С., Джанда В., Шрекенбергер П., Винн В. (2004). Микробиологическая диагностика. (5-е изд.). Аргентина, редакция Panamericana SA
6. Гонсалес М., Гонсалес Н. 2011. Руководство по медицинской микробиологии. 2-е издание, Венесуэла: Управление СМИ и публикаций Университета Карабобо.