ЛАКТОФЕНОЛОВЫЙ СИНИЙ: ХАРАКТЕРИСТИКА, СОСТАВ, СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ, ПРИМЕНЕНИЕ - ХИМИЯ - 2024

Lactophenol синий или голубой хлопок получают с единичными свойствами красителя. Он используется в клинических лабораториях в основном для окрашивания грибковых структур, таких как гифы, зародышевые трубочки и споры.

Это помогает в предположительном или предварительном диагнозе определенных грибов, однако всегда рекомендуется подкрепить диагноз более конкретными тестами, такими как биохимические или серологические тесты.

Графическое изображение окрашивания лактофеноловым синим, мазка, окрашенного лактофеноловым синим, препарата, установленного на микроскопе. Источник: Public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Лактофеноловый синий состоит из молочной кислоты, анилинового синего, глицерина, фенола и деионизированной воды. Его можно приготовить в лаборатории или купить готовым к употреблению. После приготовления он готов к использованию, ни при каких обстоятельствах его нельзя разбавлять, так как это действие даст ужасные результаты.

Концентрация его компонентов делает его идеальным для окрашивания грибковых структур, поскольку фенол устраняет сопутствующую бактериальную микробиоту, а молочная кислота образует защитную пленку вокруг грибковой структуры. Наконец, анилиновый синий имеет свойство прикрепляться к структурам грибка.

основа

Лактофеноловым синим проводится простое окрашивание грибковых структур определенной микологической культуры. Он называется простым, потому что в нем используется только один краситель.

Лактофеноловый синий, помимо окрашивания, также действует как осветлитель образца, благодаря совместному действию молочной кислоты и фенола, кроме того, фенол ведет себя как протрава и в то же время предотвращает лизис микроорганизмов, ингибируя гидролитические ферменты, которые может присутствовать.

При этом молочная кислота сохраняет морфологию структур гриба.

С другой стороны, анилиновый синий имеет свойство прилипать к хитинсодержащим структурам или связываться с ними. Конструкции окрашены в голубой цвет.

Следует отметить, что клеточная стенка грибковых микроорганизмов, особенно плесени, содержит хитин, поэтому этот краситель идеально подходит для окрашивания этих микроорганизмов.

характеристики

Раствор лактофенолового синего представляет собой слегка мутный, слегка мутный водный краситель, сильно кислый, светло-голубого цвета. Он остается стабильным при хранении при температуре от 15 ° C до 25 ° C. Флакон необходимо держать закрытым. Он вызывает раздражение и разъедает кожу и слизистые оболочки.

Сочинение

Формула для приготовления одного литра лактофенолового синего следующая:

-250 г / л молочной кислоты

-1,0 г / л анилиновый синий или метиловый синий

-500 г / л глицерина

-250 г / л фенола

-250 мл деионизированной или дистиллированной воды.

Фенол растворяют в предварительно подогретой воде. Добавляют молочную кислоту и глицерин и очень хорошо перемешивают. Наконец, растворяется анилиновый синий. Он снова перемешивается и готов к использованию.

Порции для приготовления 80 мл раствора лактофенолового синего:

-20 г кристаллов фенола

-20 мл молочной кислоты

-40 мл глицерина или глицерина

-20 мл дистиллированной воды.

использование

Он используется для окрашивания грибковых структур и, по морфологическим характеристикам, наблюдаемым на микроскопическом уровне, позволяет сделать предположительный диагноз грибка.

Обработать

Окрашивание грибковых структур культур

- Возьмите чистую культуру гриба, структуру которой необходимо наблюдать.

- Предпочтительно работать в вытяжном шкафу с ламинарным потоком или под зажигалкой, используя маску и перчатки, так как это необходимо для соблюдения стандартов биобезопасности, поскольку большинство форм легко распространяются в окружающей среде и поэтому представляют опасность. для оператора.

- На предметное стекло нанесена капля лактофенолового синего.

- Вырежьте небольшой квадрат из липкой ленты хорошего качества и очень осторожно приклейте его к концу холодно стерилизованной платиновой ручки.

- Платиновая ручка приближается к самой поверхностной части грибковой колонии и очень осторожно касается культуры именно там, где находится липкая лента.

- Затем ее переносят на предметное стекло и кладут прямо на каплю лактофенолового синего, следя за тем, чтобы лента была идеально растянута и смазана красителем. Платиновая ручка снимается очень аккуратно.

- Еще одна капля лактофенолового синего помещается на ленту, а сверху - покровное стекло. Не прикладывайте слишком сильное давление, чтобы не разрушить структуры грибка, так как они чрезвычайно хрупкие. Красителю нужно дать подействовать примерно 3-4 минуты.

- По истечении этого времени препарат готов к наблюдению под микроскопом с 10-кратным или 40-кратным увеличением. Если требуется 100-кратное наблюдение, следует использовать иммерсионное масло.

- Структуры гриба, как правило, окрашены в синий цвет, за исключением дематиасовых грибов, которые сохранят свой характерный коричневый цвет для этого типа грибов.

Прямое окрашивание биологических образцов

Если требуется исследовать прямой биологический образец, такой как мокрота, гной, экссудаты, выделения, среди прочего, они должны пройти предварительную процедуру обеззараживания образца. Для этого используется раствор NaOH.

В случае образцов волос их можно покрасить напрямую.

Несколько пораженных волос (всего 10) берут из предполагаемых очагов опоясывающего лишая (области алопеции) и помещают на предметное стекло (от 3 до 4 волос на предметное стекло). Сверху кладут несколько капель лактофенолового синего и сразу закрывают покровным стеклом.

Захватите предметное стекло щипцами и осторожно нагрейте над горелкой. Для этого сделайте от 3 до 4 быстрых проходов через пламя. Наблюдайте под микроскопом при 40-кратном увеличении и ищите споры снаружи или внутри волос (эктотрикс или эндотрикс соответственно). При необходимости добавьте иммерсионное масло и наблюдайте при 100-кратном увеличении.

Окрашивание зародышевой трубки при идентификации

После инкубации предполагаемой культуры Candida albicans в сыворотке крови человека в течение 2–4 часов при 37 ° C берут часть раствора и окрашивают лактофеноловым синим. Препарат наблюдают под микроскопом при 40X. Имеется зародышевая трубка, и бластоспоры окрашиваются в ярко-синий цвет.

Паспорт безопасности лактофенола

Национальная ассоциация противопожарной защиты (NFPA) составляет паспорт безопасности химических веществ с точки зрения риска, который он представляет в зависимости от различных аспектов, они обозначены цветным ромбом и числом от 0 до Четыре.

Опасности для здоровья обозначены синим цветом, воспламеняемость - красным, нестабильность или реакционная способность - желтым, а любые особые опасности - белым.

Здоровье

Риск для здоровья, связанный с лактофенолом синим согласно NFPA, составляет 3. Это означает, что вещество чрезвычайно опасно при проглатывании или при прямом контакте с кожей или слизистыми оболочками.

Это очень едкое и раздражающее вещество.

При попадании на кожу и слизистые оболочки вызывает сильные ожоги.

При попадании внутрь может вызвать головную боль, спутанность сознания, летаргию, потерю сознания, остановку дыхания и даже смерть.

воспламеняемость

Согласно NFPA, Лактофенол Синий имеет уровень 1 по воспламеняемости. Это означает, что он горит только при нагревании выше 94 ° C.

нестабильность

Включен в список согласно NFPA на уровне 0 (ноль) по реактивности. Это означает, что у него нет риска реактивности, то есть это химически стабильное вещество.

Особые опасности

Он не несет дополнительных особых опасностей.

Ссылки

1. SAR лаборатория. Лактофеноловый синий. 2010. Доступно на: labsar.com.
2. Лаборатория прикладной клинической химии. Лактофеноловый синий. 2015. Доступно на: cromakit.es
3. Лаборатории Мерк. Микроскопия лактофенолового синего в растворе. 2017. Доступно по адресу: Users / Equipo / Downloads.
4. Карта экстренной помощи. Лактофеноловый синий раствор для окрашивания грибков. Universidad Pontificia Javeriana, Богота, Колумбия. 2014. Доступно на: javeriana.edu.co.
5. Гонсалес М., Диамонт Д., Гутьеррес Б. Техника окрашивания грибковых структур растительными красителями в качестве экологически чистой альтернативы. Биоагро, 2011; 23 (1): 65-68. Доступно на: Redalyc.
6. Лаборатория Химедиа. Лактофенол Cotton Blue. 2017. Доступно по адресу: himedialabs.com.
7. Вангер А., Чавес В., Хуанг Р., Вахед А., Актер Дж., Дасгупта А. Биохимические тесты и методы окрашивания для идентификации микробов. Science Direct, 2017; 61-73. Доступно в: Elsevier