АГАР ФОГЕЛЯ-ДЖОНСОНА: ОБОСНОВАНИЕ, ПОДГОТОВКА И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ - БИОЛОГИЯ - 2025

Агар-Vogel Джонсон является твердой средой селективной и дифференциальная культурой, специально разработанной для выделения золотистого стафилококка. Эта среда была создана Фогелем и Джонсоном в 1960 году из модификации теллурит-глицинового агара, разработанного в 1955 году Зебовицем, Эвансом и Нивеном.

Модификация заключалась в увеличении концентрации маннита, присутствующего в среде, и во включении индикатора pH. Текущая формула состоит из триптеина, дрожжевого экстракта, маннита, дикалийфосфата, хлорида лития, глицина, фенолового красного, агара, 1% раствора теллурита калия и воды.

Источник: Pixinio.com/Laboratorio de la Clínica ProcreaTec. Flickr.

Следует отметить, что существуют и другие среды, которые, например агар Фогеля-Джонсона, являются селективными для выделения S. aureus, например, соленый агар с маннитом и агар Байрда Паркера. В этом смысле можно сказать, что основа агара Фогеля-Джонсона представляет собой смесь агара с соленым маннитом и агара Бэрда Паркера.

В первом случае колонии S. aureus различают по ферментации маннита и превращению индикатора pH в желтый. С другой стороны, во втором случае S. aureus характеризуется восстановлением теллурита до теллура и образованием колоний от серого до черного. Оба свойства наблюдаются в агаре Фогеля-Джонсона.

Эта среда, как и ее аналоги, полезна для обнаружения Staphylococcus aureus в образцах пищевых продуктов, санитарного контроля промышленных продуктов и в клинических образцах.

основа

Подача питательных веществ

Среда Фогеля-Джонсона содержит триптеин и дрожжевой экстракт; Оба вещества содержат длинноцепочечные аминокислоты, которые служат источниками углерода и азота, необходимого для роста бактерий. Бактерии, способные расти в этой среде, будут извлекать из этих веществ питательные вещества.

Избирательная власть

Агар Фогеля-Джонсона способен подавлять рост грамотрицательных бактерий и даже некоторых грамположительных бактерий, способствуя развитию коагулазоположительных стафилококков. Ингибирующие вещества - теллурит калия, хлорид лития и глицин.

Дифференциальная мощность

Вещества, составляющие эту дифференциальную среду, - маннит и теллурит калия. Маннит - это углевод, и когда он ферментируется, образуются кислоты, которые заставляют среду менять цвет с красного на желтый, что происходит благодаря присутствию красного фенольного индикатора pH.

В то время как бесцветный теллурит, когда он восстанавливается до свободного металлического теллура, принимает цвет от темно-серого до черного.

Staphylococcus aureus сбраживает маннит и восстанавливает теллурит до теллура. По этой причине типичные колонии S. aureus в этой среде серые или черные, окруженные желтой средой.

Бактерии, которые растут в этой среде и не восстанавливают теллурит или ферментный маннит, образуют прозрачные колонии, окруженные средой красного цвета, даже более интенсивного, чем исходный цвет, из-за подщелачивания среды за счет использования пептонов.

С другой стороны, бактерии, которые восстанавливают теллурит, но не ферментируют маннит, будут расти в виде серых или черных колоний, окруженных темно-красной средой.

Если бы среду готовили без добавления теллурита калия, колонии S. aureus развивались бы в виде желтых колоний, окруженных желтой средой, как в соленом маннитовом агаре.

Осмотический баланс и отвердитель

Фосфат калия поддерживает осмотический баланс среды и доводит рН до нейтрального 7,2. При этом агар придает культуральной среде твердую консистенцию.

подготовка

Раствор теллурита калия 1% мас. / Об.

Этот раствор не входит в дегидратированную среду, так как его нельзя стерилизовать в автоклаве. По этой причине его готовят отдельно и добавляют к уже стерилизованной среде.

Некоторые коммерческие предприятия продают готовый к употреблению 1% раствор теллурита калия. Если вы хотите подготовиться в лаборатории, действуйте следующим образом:

Взвесьте 1,0 г теллурита калия и отмерьте 100 мл дистиллированной воды. Растворите теллурит калия в части воды, а затем доведите количество воды до 100 мл. Стерилизовать раствор методом фильтрации.

Базовая среда агара Фогеля-Джонсона

Взвешивают 60 г обезвоженной среды и растворяют в 1 л дистиллированной воды. Смесь нагревают до кипения для полного растворения. В процессе растворения среду часто перемешивают.

Стерилизовать в автоклаве при давлении 15 фунтов и температуре 121 ° C в течение 15 минут. Извлеките из автоклава и дайте ему постоять, пока среда не достигнет температуры приблизительно от 45 до 50 ° C. Добавьте 20 мл заранее приготовленного 1% раствора теллурита калия.

Перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. Дайте застыть и закажите в перевернутом виде на держателях тарелок, чтобы потом хранить в холодильнике до использования.

Конечный pH приготовленной среды должен составлять 7,2 ± 0,2.

Перед посевом образца подождите, пока чаша не достигнет комнатной температуры.

Цвет подготовленной среды красный.

использование

Хотя его можно использовать для изоляции S. aureus в образцах любого типа, он в основном используется для микробиологического анализа фармацевтических продуктов, косметики и пищевых продуктов.

Рекомендуется, чтобы посевной материал был плотным. Посев можно произвести, надрезав платиновую ручку или по поверхности шпателем Дригальского.

Планшеты инкубируют при 35-37 ° С в течение 24-48 часов при аэробиозе.

контроль качества

Для контроля качества среды Фогеля-Джонсона можно использовать следующие контрольные штаммы:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 или Proteus mirabilis ATCC 43071.

Ожидаемый результат следующий: для штаммов S. aureus рост удовлетворительный с черными колониями, окруженными желтой средой. Для S. epidermidis регулярный рост с полупрозрачными или черными колониями, окруженными красной средой.

Аналогичным образом ожидается полное ингибирование для E. coli и частичное или полное ингибирование для Proteus mirabilis; если он растет, он будет делать это умеренно, и колонии будут черными, окруженными красным цветом.

Ссылки

1. BD Laboratories. VJ (Агар Фогеля и Джонсона). 2006. Доступно на: bd.com
2. Britannia Laboratories. Фогель-Джонсон Агар. 2015. Доступно на: britanialab.com.
3. Britannia Laboratories. Теллурит калия. 2015. Доступно на: britania.com.
4. Лаборатория Химедиа. Агаровая среда Фогеля-Джонсона. 2018 г. Доступно по адресу: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
5. Агаровая база Фогеля-Джонсона. Руководство по микробиологии Merck. 12-е издание, стр. 502-503. Доступно по адресу: Пользователи / Команда / Загрузки
6. Авторы Википедии, «Агар Фогель Джонхсон», Википедия - бесплатная энциклопедия, доступная по адресу: wikipedia.org.
7. Венесуэльский стандартный ковен 1292-89. (1989). Продукты. Выделение и подсчет Staphylococcus aureus. Доступно на: sencamer.gob.ve