САЛЬМОНЕЛЛЕЗНО-ШИГЕЛЛОВЫЙ АГАР: ОБОСНОВАНИЕ, ПОДГОТОВКА И ПРИМЕНЕНИЕ - БИОЛОГИЯ - 2025

Агар сальмонелла шигелла также известная как SS агар является селективной и дифференциальной средой умеренно, специально предназначенным для изоляции энтеропатогенных бактерий родов Salmonella и Shigella, как пробы окружающей среды , таких как клинические.

SS-агар имеет сложный состав; Он состоит из мясного экстракта, пептона, лактозы, солей желчных кислот, цитрата натрия, тиосульфата натрия, цитрата железа, агара, нейтрального красного, ярко-зеленого и дистиллированной воды. Благодаря высокой селективности можно высевать образцы с обильной смешанной флорой.

SS-агар с колониями Salmonella sp. Источник: Manurx27, из Wikimedia Commons

В микробиологических лабораториях среда Salmonella-Shigella широко используется для исследования присутствия сальмонелл и шигелл в образцах диарейного стула, сточных вод, питьевой воды и пищевых продуктов.

Иногда необходимо использовать бульоны предварительного обогащения (бульон лактозы) и бульоны обогащения (бульон селенита цистина) для восстановления штаммов Salmonella.

Эти шаги необходимы, когда есть подозрение на существование сальмонеллы в очень небольшом количестве или когда этот штамм может быть использован в процессах, типичных для промышленного производства, в основном в переработанных пищевых продуктах. Также рекомендуется обогащать образцы стула пациентов, которые лечились антибиотиками.

Затем обогащенный бульон можно засеять на агар Salmonella-Shigella и другие подобные среды, такие как агар с ксилозой, дезоксихолат лизина (XLD) и кишечный агар Hektoen (HE).

основа

Каждый компонент питательной среды Salmonella-Shigella выполняет определенную функцию, и смесь в целом придает ей свойства, которые ее характеризуют.

Питательная сила

Экстракт мяса и пептон (перевариваемый казеином и тканями животных) обеспечивают необходимые питательные вещества (азот, углерод и витамины) для развития микроорганизмов, способных переносить остальные компоненты.

консистенция

Агар-агар обеспечивает твердую консистенцию среды.

выборочный

Эта среда очень избирательна, поскольку содержит соли желчных кислот, цитрат натрия и ярко-зеленый цвет. Следовательно, он подавляет рост всех грамположительных бактерий и большинства грамотрицательных бацилл, включая некоторые колиформные бактерии.

Хотя бактерии рода Salmonella и некоторые штаммы Shigella поддерживают эти соединения.

В основном, род Salmonella очень устойчив к солям желчных кислот, настолько, что они могут жить в желчном пузыре некоторых пациентов-носителей, которые постоянно выделяют бактерии со своим стулом.

дифференцированный

Лактоза - это ферментируемый углевод, который помогает дифференцировать штаммы, ферментирующие лактозу, от неферментирующих. Об этом свойстве свидетельствует наличие индикатора pH, которым в данной среде является феноловый красный.

Штаммы, ферментирующие лактозу, дают красные колонии, в то время как неферментирующие штаммы бесцветны. Эта характеристика важна, поскольку сальмонелла и шигелла не ферментируют лактозу.

С другой стороны, эта среда содержит тиосульфат натрия как источник сульфида и цитрат трехвалентного железа как источник железа. Оба соединения способны дифференцировать бактерии, способные производить сероводород. Они реагируют с образованием видимого нерастворимого черного осадка сульфида железа (III).

Это свойство обнаружено у некоторых штаммов рода Salmonella. Обычно их колонии плоские, бесцветные с черной точкой в ​​центре. Остальные сальмонеллы не производят H ₂ S и развиваются в виде бесцветных колоний.

С другой стороны, колонии рода Shigella плоские, бесцветные, без почернения.

подготовка

Эту среду очень просто приготовить.

Взвешивают 63 г дегидратированной коммерческой среды и растворяют в литре дистиллированной воды. Нагрейте раствор и перемешайте. Смесь может кипеть до минут.

Эту среду нельзя автоклавировать. После растворения его подают прямо на одинарные или двойные стерильные чашки.

Когда они застывают, они перевернуты на тромбоцитах и ​​хранятся в холодильнике (2-8 ° C) до использования.

После приготовления среда должна оставаться при pH 7,2 ± 0,2 и иметь оранжево-красный цвет.

Перед посевом образцов важно дать планшетам прогреться. Исходный образец можно засеять напрямую, высыпая материал на часть агара, а затем отсеивая оттуда штрих.

В случае использования обогащенных бульонов пропустить порцию селенитового бульона и высеять лопаткой дригальского.

Инкубируйте при 37 ° C в течение 24 часов в условиях аэробиоза.

Имейте в виду, что количество взвешиваемых граммов и конечный pH среды могут варьироваться от одного коммерческого предприятия к другому. Средняя база всегда дает показания к ее приготовлению.

использование

Он часто используется при анализе культур кала и микробиологических исследованиях сточных вод, питьевой воды и образцов пищевых продуктов.

Часто готовят двойные чашки, на одну сторону помещают агар Salmonella-Shigella, а на другую - агар XLD.

Ограничения

-Некоторые штаммы Shigella не растут в этой среде. Поэтому его не рекомендуется использовать для первичной изоляции этого рода.

-Не всякая прозрачная колония с черным центром указывает на сальмонеллу; Для правильной идентификации необходимо провести биохимические тесты, поскольку колонии некоторых штаммов Proteus неотличимы от колоний Salmonella.

- Обезвоженная среда должна заботиться о воздействии окружающей среды, поскольку она очень гигроскопична. Поэтому его нужно хранить в сухом и хорошо закрытом помещении. Открыт на очень короткие периоды.

- Со временем соли желчных кислот в среде могут выпадать в осадок, образуя изображение, подобное мату внутри агара, но это не влияет на результаты.

-Некоторые штаммы Shigella могут медленно сбраживать лактозу.

контроль качества

Чтобы убедиться, что среда работает правильно, рекомендуется высадить известные или сертифицированные контрольные штаммы и понаблюдать, соответствует ли рост ожидаемым характеристикам.

Для этого могут использоваться штаммы E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium или Enterococcus faecalis.

Ожидаемые результаты:

Enterobacter и Klebsiella ------ большие колонии и красные или розовые мукоиды.

Shigella flexneri ---------- прозрачные или бесцветные плоские колонии.

Salmonella typhimurium ------ бесцветные колонии с черным центром.

Enterococcus faecalis -------- полное торможение.

Ссылки

1. Дифко Франсиско Сориа Мельгисо Лаборатории. Сальмонеллезно-шигелловый агар. 2009. Доступно на: f-soria.es
2. БД Лаборатория. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Доступно на: bd.com
3. Britannia Laboratories. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Доступно на: britanialab.com.
4. Valtek диагностика. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar ).2010. Доступно на: andinamedica.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологический диагноз Бейли и Скотта. 12 изд. Редакция Panamericana SA Аргентина.
6. Конеман Э, Аллен С., Джанда В., Шрекенбергер П., Винн В. (2004). Микробиологическая диагностика. 5-е изд. Редакция Panamericana SA Аргентина.