АГАР МАККОНКИ: ОБОСНОВАНИЕ, ПОДГОТОВКА И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ - БИОЛОГИЯ - 2025

МакКонки агар представляет собой твердый носитель , который позволяет исключительную изоляцию грамотрицательных бактерий. По этой причине это селективная среда, а также позволяет различать ферментирующие лактозу и неферментирующие бациллы, что делает ее дифференциальной средой. Это одна из наиболее широко используемых питательных сред в микробиологической лаборатории.

Эта среда в основном используется для изоляции грамотрицательных бактерий, принадлежащих к семейству Enterobacteriaceae, включая условно-патогенные и энтеропатогенные виды.

Агар МакКонки засевают двумя типами бактерий. Колонии, ферментирующие лактозу слева, колонии, не ферментирующие лактозу, справа.

Его также можно использовать для выделения других кишечных бацилл, которые живут в желудочно-кишечном тракте, но не принадлежат к Enterobacteriaceae, например, Aeromonas sp, Plesiomonas sp.

Наконец, он может изолировать другие грамотрицательные бациллы, не ферментирующие глюкозу, которые встречаются в окружающей среде, воде или почве, но иногда могут быть условно-патогенными микроорганизмами, такими как Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia и другие.

основа

МакКонки агар

Основа этой среды может быть объяснена посредством описания ее компонентов, поскольку каждый из них имеет цель, определяющую его свойства.

Желчные соли и кристаллический фиолетовый

В этом смысле агар МакКонки имеет сложный состав. В первую очередь он содержит соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый.

Эти элементы несут ответственность за подавление роста грамположительных бактерий и некоторых привередливых грамотрицательных бацилл. В свою очередь, это способствует развитию грамотрицательных бактерий, на которые эти вещества не влияют. Следовательно, это селективная среда.

Считается, что он немного селективен по сравнению с другими средами, которые также подавляют рост грамположительных бактерий, а также большинства грамотрицательных бактерий.

Пептоны, полипектоны и лактоза

Он содержит вещества, которые обеспечивают необходимые питательные вещества для микроорганизмов, которые развиваются в этой среде, такие как пептоны, полипектоны и лактоза.

Лактоза является ключевым моментом в том, чтобы среда была дифференциальной средой, поскольку у микроорганизмов, способных ферментировать лактозу, образуются сильные розовые колонии.

Некоторые бактерии могут медленно или слабо ферментировать лактозу, образуя бледно-розовые колонии и оставаясь положительными на лактозу.

Те, которые не ферментируют лактозу, используют пептоны в качестве источника энергии, производя аммиак и подщелачивая среду. По этой причине образующиеся колонии бесцветны или прозрачны.

Индикатор PH

Изменение цвета достигается за счет другого важного соединения, которое имеет агар МакКонки. Это соединение является индикатором pH, который в данном случае имеет нейтральный красный цвет.

Ферментация лактозы приводит к образованию смешанных кислот. Они подкисляют среду до pH ниже 6,8.

В результате индикатор pH приобретает темно-розовый оттенок. Интенсивность цвета может варьироваться в зависимости от конечного pH.

Дистиллированная вода, хлорид натрия и агар

С другой стороны, он содержит дистиллированную воду и хлорид натрия, которые обеспечивают гидратацию среды и осмотический баланс. Наконец, среда содержит агар, который является основой, обеспечивающей консистенцию твердой среды.

Приготовленная агаровая среда MacConkey должна иметь конечный pH, доведенный до 7,1 ± 0,2.

подготовка

Для одного литра агара МакКонки необходимо взвесить 50 г обезвоженной среды, затем поместить в колбу и растворить в одном литре дистиллированной воды. После 10 минут отстоя его нагревают, постоянно перемешивая до кипения в течение 1 минуты.

Затем колбу помещают в автоклав и стерилизуют при 121 ° C в течение 20 минут. По истечении этого времени его вынимают из автоклава и дают ему остыть до температуры 45 ° C, чтобы затем подавать в стерильных чашках Петри в вытяжном шкафу с ламинарным потоком или перед горелкой Бунзена.

Дайте застыть и храните в перевернутом держателе тарелок и охладите в холодильнике при 2-8 ° C до использования.

Чтобы получить агар МакКонки, который ингибирует эффект своринга, производимый представителями рода Proteus, используют агар МакКонки с низким содержанием соли.

Использование обычного агара МакКонки

Агар МакКонки входит во все наборы питательных сред, предназначенные для посева клинических образцов, полученных в лаборатории. Он также полезен в пищевой микробиологии и микробиологии окружающей среды.

Разнообразие грамотрицательных палочек, которые растут в этой среде, выражают фенотипические характеристики, которые помогают сделать предположительный диагноз рассматриваемого вида. Например, размер, цвет, консистенция и запах колоний - вот некоторые из характеристик, которыми можно руководствоваться.

В этой среде виды Escherichia coli, Klebsiella sp и Enterobacter sp образуют сильные розовые колонии, окруженные зоной осажденной желчи.

Принимая во внимание, что бактерии, такие как Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp и Hafnia sp, могут казаться бесцветными через 24 часа или бледно-розовыми через 24-48 часов.

Точно так же роды Proteus, Edwadsiella, Salmonella и Shigella образуют бесцветные или прозрачные колонии.

Другие варианты агара МакКонки

Существуют и другие варианты агара МакКонки, которые имеют определенные цели. Они упомянуты ниже:

Агар МакКонки с сорбитолом

Эта среда была разработана, чтобы отличить энтеропатогенный штамм (энтерогеморрагический штамм Escherichia coli O157: H7) от остальных штаммов Escherichia coli.

Эта среда обменивает углеводную лактозу на сорбит. Энтерогеморрагические штаммы E. coli O157: H7 отличаются от остальных, потому что они не ферментируют сорбит, и поэтому получаются прозрачные колонии, тогда как остальные штаммы E. coli ферментируют сорбит, и колонии ярко-розового цвета.

Агар МакКонки без кристаллического фиолетового и без соли

Этот агар сильно отличается от классического агара МакКонки, так как он не имеет фиолетовых кристаллов и грамположительные бактерии могут расти.

С другой стороны, отсутствие соли препятствует появлению скопления на агаре, продуцируемого некоторыми кишечными бациллами, такими как бактерии рода Proteus, и, таким образом, облегчает изоляцию всех присутствующих бактерий, включая грамположительные бактерии.

Агар МакКонки с цефоперазоном

Этот вариант агара МакКонки был разработан для первоначальной изоляции Laribacter hongkongensis и позже был признан полезным для выделения Arcobacter butzleri. Оба являются слегка изогнутыми грамотрицательными стержнями, устойчивыми к цефоперазону.

Недавно было установлено, что эти бактерии вызывают гастроэнтерит и приобретенную диарею у людей из Азии и Европы, представляя собой два мощных возникающих патогена.

Антибиотик позволяет подавлять сопутствующую флору желудочно-кишечного тракта, которая способствует развитию этих бактерий, не позволяя им оставаться незамеченными, так как им требуется 72 часа для роста.

Агар МакКонки, приготовленный с морской водой при 10% об. / Об.

Этот вариант полезен для оценки бактериальных санитарных показателей фекального загрязнения, в том числе общих колиформных и фекальных колиформ в рекреационных соленых водах (пляжи и заливы).

Cortez et al. В 2013 году продемонстрировали, что среда, приготовленная таким образом, значительно увеличивает восстановление этих микроорганизмов в солевой среде по сравнению с использованием агара MacConkey, приготовленного с дистиллированной водой.

Это связано с тем, что модифицированная среда стимулирует рост бактерий, которые физиологически находятся в латентном состоянии «жизнеспособные, но не культивируемые», поэтому их невозможно восстановить в обычных средах.

Ссылки

1. Лау С.К., Ву ПК, Хуэй В.Т. и др. Использование агара MacConkey с цефоперазоном для селективного выделения Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. МакКонки агар. Википедия, свободная энциклопедия. 4 апреля 2018, 18:16 UTC. 29 декабря 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологический диагноз Бейли и Скотта. 12 изд. Аргентина. Редакция Panamericana SA
4. Конеман Э, Аллен С., Джанда В., Шрекенбергер П., Винн В. (2004). Микробиологическая диагностика. (5-е изд.). Аргентина, редакция Panamericana SA
5. Кортез Дж., Руис Ю., Медина Л., Вальбуэна О. Влияние питательных сред, приготовленных с морской водой, на показатели здоровья в морских водах курортов в Чичиривиче, штат Фалькон, Венесуэла. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. Гарсия П., Паредес Ф., Фернандес дель Баррио М. (1994). Практическая клиническая микробиология. Университет Кадиса, 2-е издание. Служба публикаций УЦА.