- основа
- подготовка
- использование
- Тип образцов
- отбор проб
- Идентификация образца
- Перевод
- Исследование транспортных средств Кэри Блэра
- контроль качества
- Ссылки
Средний Cary Blair является полужидким агаром, используемым для транспортировки и сохранения биологических образцов укрывательства кишечных патогенных микроорганизмов, микроорганизмов и анаэробных лабильного. Как и все транспортные средства, его функция - поддерживать образец в оптимальных условиях, пока он не будет выращен. Присутствующие патогенные микроорганизмы, а также сопутствующая микробиота должны оставаться жизнеспособными, но без увеличения их популяции.
Среда Кэри Блэра является результатом изменения состава транспортной среды Стюарта. Модификация была проведена в 1964 году и заключалась в замене системы регулирования pH (глицерофосфат) на фосфатированный неорганический буфер.
A. Культурист со средой Кэри Блэра B. Коллектор стула со средой Кэри Блэра. Источник: A. Видео Meganhow, получить культуру раны 2011 youtube.com B. Пользователь: Mattes
Переформулировка была необходима, потому что ее создатели поняли, что глицерофосфат через определенное время может метаболизироваться некоторыми сапрофитными бактериями. Они многократно перекрывают присутствующие патогены.
Другими изменениями были устранение метиленового синего, а также корректировка pH в сторону щелочности (pH 8,4). Все эти изменения повысили эффективность транспортных средств.
Первоначально среда Кэри Блэра использовалась для поддержания кишечных патогенов, таких как Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae и Campylobacter sp.
Однако впоследствии была выявлена эффективность сохранения жизнеспособности требовательных и лабильных патогенов, таких как Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae и некоторых анаэробов.
основа
Среда Кэри Блэра содержит хлорид натрия, тиогликолят натрия, динатрийфосфат, хлорид кальция и агар.
Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды, динатрийфосфат и хлорид кальция уравновешивают pH. Со своей стороны, тиогликолят натрия поддерживает низкий окислительно-восстановительный потенциал, в то время как небольшая часть агара обеспечивает полутвердую консистенцию.
Среда Кэри Блэра не содержит питательных веществ, так как функция транспортной среды состоит в том, чтобы удерживать образец, не подвергая его изменениям с точки зрения влажности и микробной нагрузки; то есть предотвращает обезвоживание образца, сохраняя при этом жизнеспособность и количество присутствующих микроорганизмов.
Наконец, слабощелочной pH предотвращает гибель микроорганизмов из-за кислотности, особенно вибрионы очень чувствительны к кислотам.
подготовка
Среда Кэри Блэра коммерчески доступна в виде специального готового к использованию устройства. Транспортная система закрыта пластиковым пакетом Peel Pack. Внутри него находится тампон для отбора пробы и трубка-контейнер для полутвердой среды Кэри Блэра.
Также на рынке есть коммерческие предприятия, которые поставляют обезвоженную среду для ее приготовления в лаборатории.
Для этого взвесьте 13,2 г обезвоженной среды и растворите ее в одном литре дистиллированной воды. Нагрейте и встряхните препарат до полного растворения. Распределите среду по пробиркам с завинчивающейся крышкой (бакелит).
Готовьте пробирки на пару 15 минут. Дать остыть и хранить при комнатной температуре до использования.
Незараженную среду Кэри Блера можно оптимально хранить до 18 месяцев при комнатной температуре.
Уровень pH среды должен быть доведен до 8,4 ± 0,2. Цвет приготовленной среды - бежевый, с некоторой опалесценцией.
использование
Тип образцов
Среда Кэри Блэра используется, когда образцы кала, ректальных мазков и вагинальных мазков не могут быть обработаны немедленно.
Когда нет транспортных средств, образцы можно хранить при -70 ° C.
отбор проб
Тампон пропитывается образцом и вводится в среду Кэри Блера, не доходя до дна.
Идентификация образца
Среда Кэри Блэра должна иметь этикетку, на которой размещены основные данные, такие как: имя и фамилия пациента, идентификационный номер образца, источник сбора образца, лечащий врач, дата и время сбора. образец, предположительный диагноз, лечение антибиотиками.
Перевод
Плотно закрытый и транспортированный при комнатной температуре в случае образцов кала. Принимая во внимание, что для вагинальных образцов в поисках анаэробных микроорганизмов рекомендуется транспортировать образцы при 4 ° C.
Во всех случаях рекомендуемое время перевода составляет 4-6 часов, но не более 24 часов.
Если есть подозрение на присутствие Campylobacter jejuni в образцах стула, и они не могут быть обработаны в течение 24 часов, рекомендуется хранить в среде Кэри Блера при 4 ° C.
Исследование транспортных средств Кэри Блэра
Несколько исследований показали, что среда Кэри Блэра может оставаться жизнеспособной для энтеропатогенных микроорганизмов рода Shigella и Salmonella в течение 49 дней после взятия образца.
Vibrio cholerae, еще один важный кишечный патоген, способен выживать в течение 22 дней, тогда как Yersinia pestis (возбудитель бубонной и легочной чумы) может вылечиться через 75 дней.
Однако, несмотря на продемонстрированную долговечность с точки зрения восстановления этих микроорганизмов, рекомендуется как можно быстрее доставить взятые пробы в среде Кэри Блэра в лабораторию.
Аналогичным образом, как только образец попадает в лабораторию, его необходимо без промедления засеять в соответствующие питательные среды.
С другой стороны, среда Кэри Блэра, помимо того, что она полезна для переноса факультативных микроорганизмов, также рекомендуется для образцов, содержащих анаэробные патогены.
В этом смысле ДеМарко и др. В 2017 году провели исследование под названием «Выживание вагинальных микроорганизмов в трех коммерчески доступных транспортных системах».
Они продемонстрировали, что транспортная среда Кэри Блэра является лучшей транспортной средой для сохранения и восстановления вагинальных анаэробных микроорганизмов. Точно так же они показали, что самая высокая скорость восстановления была достигнута при температуре переноса 4 ° C.
Таким образом, делается вывод, что температура транспортировки вагинальных мазков (анаэробных микроорганизмов) должна быть на уровне 4 ° C. В то время как для проб фекалий в поисках факультативных микроорганизмов идеальной температурой является комнатная температура.
контроль качества
Для оценки контроля качества транспортной среды Кэри Блэра штаммы, известные как Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae и Campylobacter sp.
Среду инокулируют выбранным штаммом и выдерживают при комнатной температуре в течение 24 часов. Затем их высевают в соответствующие питательные среды. Во всех случаях ожидается удовлетворительное выздоровление рассматриваемого микроорганизма.
Ссылки
- Демарко А.Л., Рабе Л.К., Остин М.Н. и др. Выживание вагинальных микроорганизмов в трех коммерчески доступных транспортных системах. Анаэробные. 2017; 45: 44–49.
- Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Сравнение консервационных сред для хранения образцов стула. J Clin Microbiol. тысяча девятьсот девяносто пятый год; 33 (8): 2176–2178.
- Дэн М., Ричардсон Дж., Милиотис, доктор медицины, Коорнхоф, Х.Дж. Сравнение консервационных сред и условий замораживания для хранения образцов фекалий. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
- Конеман Э, Аллен С., Джанда В., Шрекенбергер П., Винн В. (2004). Микробиологическая диагностика. 5-е изд. Редакция Panamericana SA Аргентина.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологический диагноз Бейли и Скотта. 12 изд. Редакция Panamericana SA Аргентина.
- Conda Pronadisa Laboratories. Половина Кэри Блэра. Доступно на: condalab.com
- Лаборатория Метрикс. Кэри Блэр. Доступно на: metrixlab.mx