КУЛЬТУРА КРОВИ: ДЛЯ ЧЕГО, ОБОСНОВАНИЕ, ПРОЦЕДУРА, РЕЗУЛЬТАТЫ - БИОЛОГИЯ - 2025

Посев крови - это бактериологический тест, цель которого - выявить присутствие в крови микроорганизмов. Кровь по своей природе является стерильной жидкостью и поэтому должна храниться в физиологических условиях, поэтому присутствие бактерий или грибков в крови всегда является патологическим.

Когда бактерии или грибки обнаруживаются в крови, но их размножение не превышает устранения микроорганизмов иммунной системой, это называется бактериемия (для бактерий) или фунгемия (для грибов); Но если количество микроорганизмов бесконтрольно увеличивается, это называется септицемией.

Бутылки для посева крови (желтые: детский аэробиоз, зеленые: аэробиоз взрослых и красные: анаэробиоз взрослых). Источник: фотография автора MSc Marielsa Gil.

Бактериемия, фунгемия и сепсис ставят под угрозу жизнь пациента и поэтому требуют немедленного лечения. Именно поэтому при подозрении на инфекцию в крови врачи запрашивают посев крови.

Этот бактериологический анализ позволяет узнать, есть ли в крови инфекция и какой микроорганизм вовлечен. Кроме того, если результат положительный, проводится тест на чувствительность, чтобы узнать, какой антибиотик или противогрибковый препарат можно использовать в лечении.

Если, с другой стороны, посев крови отрицательный через 24 часа инкубации, его не следует выбрасывать, пока он не станет отрицательным через 240 часов. Это гарантирует отсутствие медленно растущих микроорганизмов.

Чтобы посев крови был надежным, при взятии пробы должны быть приняты крайние меры асептики, а для повышения надежности и чувствительности теста необходимо взять по крайней мере два образца во время или около пика лихорадки.

Для чего это?

Кровь - это стерильная жидкость, и при обнаружении в ней микроорганизмов это 100% патология. Эта ситуация представляет собой очень деликатную клиническую картину, которая ставит под угрозу жизнь пациента.

Посев крови - важный бактериологический тест, который определяет присутствие микроорганизмов в кровотоке.

Микроорганизмы могут попадать в кровь разными путями, которые могут быть внесосудистыми инфекциями, такими как пневмония, внутрибрюшные инфекции, пиелонефрит, серьезные инфекции кожи, мягких тканей или артрит и другие.

Или это также может быть внутривенно, например, заражение внутривенных или артериальных катетеров, эндокардит, внутривенная лекарственная зависимость, введение зараженных лекарств или растворов и т. Д.

Своевременное обнаружение и лечение возбудителя сепсиса имеет важное значение для обеспечения выживания пациента.

В этом смысле врач должен указать на проведение посева крови, когда он наблюдает признаки и симптомы, указывающие на сепсис, такие как: лихорадка (более 38 ° C) без видимого инфекционного очага или, наоборот, гипотермия (<de 36 ° С).

Другими признаками могут быть: озноб, повышенное количество лейкоцитов (> 10 000 клеток / мм ³ ) или значительное уменьшение полиморфно-ядерных клеток (<1000 PMN / мм ³ ). А также внезапное ухудшение состояния нескольких органов или внезапная потеря жизнеспособности среди других предупреждающих знаков.

Бактериемия может быть постоянной, преходящей или прерывистой. Это важно при отборе образца, так как его необходимо брать, когда существует большая вероятность обнаружения циркулирующего микроорганизма.

Поэтому рекомендуется брать как минимум 2 пробы в разных местах. Кроме того, в идеале образец должен быть взят в пиковые периоды лихорадки или когда у пациента появляется дрожь, сильное переохлаждение, потливость или тахикардия.

Однако для того, чтобы посев крови стал действительно полезным инструментом, образец необходимо отбирать с особой осторожностью. Плохое обращение или плохая асептика во время взятия пробы могут сделать тест недействительным и получить ложноположительные результаты.

основа

Исследование заключается в асептическом взятии двух или трех образцов крови и их помещении в специальные флаконы.

Специальные устройства для культивирования образцов крови называются флаконами для культур крови. Они подразделяются на:

В зависимости от возраста пациента

-Детское использование

-Для взрослых.

По типу микроорганизма

-Фляги для аэробных микроорганизмов (аэробные бактерии, факультативные бактерии и грибки).

-Сосуды для культивирования крови для анаэробных микроорганизмов (строго анаэробных бактерий).

Некоторые содержат жидкую культуральную среду, а некоторые - твердую и жидкую культуральную среду одновременно. Они также существуют с частицами активированного угля.

Обработать

Рекомендации по отбору проб

- Образец должен отбирать высококвалифицированный и обученный персонал в области микробиологии.

- Асептика или тщательная очистка места сбора проб, несомненно, самый важный шаг.

- Как и при любом отборе проб, медицинский персонал должен полностью соблюдать меры биобезопасности во время процесса (использование перчаток, халата, очков, среди прочего).

- Позаботьтесь о том, чтобы все необходимые инструменты для взятия проб были в наличии.

- Промаркируйте флаконы с полным именем пациента, датой, номером медицинской карты, временем сбора пробы и порядковым номером лаборатории.

-Идеальный вариант - взять образец до того, как пациент начнет антимикробную терапию. Это указывается только в том случае, если есть подозрение на то, что лечение не работает. В этом случае образец следует взять до смены препарата, используя флаконы для посева крови с ингибиторами антибиотиков (частицы активированного угля).

- По крайней мере, 2 образца должны быть взяты из разных анатомических участков, таких как правая рука и левая рука. При подозрении на эндокардит рекомендуется взять 3 пробы. В каждую пробу будут включены две бутылки (одна для аэробиоза и одна для анаэробиоза).

Количество образца

Количество образца варьируется в зависимости от возраста пациента, но всегда следует поддерживать соотношение от 1: 5 до 1:10 в отношении разведения крови / культурального бульона.

У новорожденных рекомендуемое количество пробы - 1 мл крови на флакон. Используется педиатрический флакон.

Для младенцев в возрасте от одного месяца до одного года ее можно увеличить до 1,5 мл крови на бутылку. Используется педиатрический флакон.

У детей старше 2 лет соответствующее количество пробы составляет 2,5 мл крови на флакон. Используется педиатрический флакон.

С подросткового возраста его можно увеличить до объема крови от 5 до 10 мл на флакон. Используется бутылка для взрослых.

Наконец, на взрослом этапе необходимое количество составляет 8-10 мл на флакон. Используется бутылка для взрослых.

отбор проб

- Образец крови может быть венозным или артериальным. Однако артериальная кровь берется только тогда, когда забор венозной крови невозможен.

- Не рекомендуется брать образец из центрального венозного катетера, если:

1. Забор пробы периферически (венозный или артериальный) невозможен.
2. Пациенты с риском кровотечения.
3. Когда врач подозревает бактериемию из-за загрязнения центрального венозного катетера.
4. Когда лихорадка снова появляется после прекращения лихорадки в течение 4–5 дней, независимо от того, принимает ли пациент противомикробные препараты или нет.

Асептика перед взятием проб

- Выберите анатомические участки для отбора проб. Как правило, выбираются вены лучшего калибра (базиликатная или головная вена).

- Согласно Центрам по контролю за заболеваниями (CDC) в Атланте (США), оператор должен мыть руки 2% хлоргексидином или 10% йодом повидона перед взятием проб, а также носить перчатки.

-Пальпируйте и найдите вену, которую нужно использовать.

-Очистите место прокола вращающимися движениями от центра кнаружи, используя мыльный хлоргексидин или антисептическое мыло. Промыть стерильным физиологическим раствором.

Впоследствии нанесите антисептик и дайте ему подействовать. Пример: хлоргексидин глюконат 0,5% в течение 1 минуты или повидон йод 10% в течение 2 минут. В последнем случае сначала спросите, есть ли у пациента аллергия на йод. Если у вас аллергия, можно заменить 70% алкоголь.

Отбор образца

- Поместите жгут, чтобы усилить кровоток и прорасти вены.

- Не прикасайтесь пальцем к месту прокола снова. Если это строго необходимо, палец следует мыть так же, как и место прокола.

-Введите иглу инъектора или кожу головы в вену и извлеките необходимое количество крови.

-Не кладите на иглу вату или марлю при ее снятии, если она не стерильна.

-Снимите защитную пломбу с бутылок очень осторожно, не касаясь крышки. Некоторые авторы рекомендуют провести дезинфекцию крышки перед инокуляцией образца.

- Распределите необходимое количество крови по флаконам. Если проба отбирается с помощью инжектора, необходимое количество сначала переливается в анаэробную колбу, а затем в аэробную колбу. Если прием проводится скальпом (бабочкой), его разливают в обратном порядке.

- Аккуратно перемешайте флакон с культурой крови, переворачивая его.

- Смените перчатки и повторите предыдущие шаги для второго отбора проб.

-Если второй образец взят из другого места, это можно сделать немедленно, но если он взят из того же места, вы должны подождать от 30 до 90 минут между одним образцом и другим.

- Образец необходимо как можно скорее доставить в лабораторию, если это невозможно, его следует оставить при комнатной температуре на срок до 18 часов.

культура

Попав в лабораторию, колбы инкубируют при 37 ° C в условиях каждой колбы, то есть при аэробиозе и анаэробиозе соответственно.

При ручном методе кольцевание следует начинать через 24 часа инкубации, а затем - между днями. Кольца выполняются следующим образом: сначала дезинфицируется крышка флакона и вводится игла стерильного инжектора. Жидкость извлекают из колбы и высевают на кровяной агар и шоколадный агар.

Если есть рост, проводится грамм, пересев в определенные среды, биохимические тесты и антибиотикограмма.

В автоматизированных методах оборудование Bact / Alert подает сигнал тревоги, когда обнаруживает, что флакон положительный. Таким же образом следует постучать по кровяному агару и шоколадному агару.

Другой метод, который набирает силу, - это анализ колбы после 6 часов инкубации с помощью масс-спектрометрии. Этот метод помог повысить чувствительность и скорость диагностики.

Полученные результаты

Если результат посева крови отрицательный, лечащему врачу могут быть предоставлены предварительные промежуточные отчеты. В отчете указывается, что в часы инкубации он отрицательный. Например, если он станет отрицательным до четвертого дня, об этом будет сообщено следующим образом:

Предварительный результат: отрицательный посев через 96 часов инкубации.

Примечание: учеба продолжается 240 часов.

Если посев крови положительный, лечащий врач немедленно информируется и отправляется отчет, содержащий как минимум грамм колонии. Пример:

Предварительный результат: в положительной культуре через 48 часов инкубации наблюдаются грамотрицательные бациллы и отрицательная оксидаза. Идентификация и тестирование чувствительности находятся в процессе.

Эта информация помогает лечащему врачу начать эмпирическую терапию возможного микроорганизма в ожидании окончательного лабораторного результата.

После завершения бактериологического исследования, то есть выявления микроорганизма и получения антибиотикограммы, как можно скорее необходимо отправить окончательный отчет.

Следует проявлять особую осторожность, если организмом-мишенью является Neisseria gonorrhoeae или Neisseria meningitidis, поскольку эти бактерии подавляются в присутствии высоких концентраций полианетосульфоната натрия (SPS).

Вот почему это соединение не должно превышать 0,025% во флаконах для культур крови.

С другой стороны, если образец культуры крови сначала берется в пробирки Vacutainer, в этих пробирках обнаруживаются концентрации SPS, токсичных для менингококков и гонококков, поэтому кровь должна быть перенесена в течение 1 часа в систему культивирования бульона.

Как определить положительный результат посева крови или заражение

Посев крови считается загрязненным, если имеется рост только в одном флаконе с культурой крови из общего количества взятых. И подозрение на заражение возрастает, если изолированный микроорганизм представляет собой обычную микробиоту кожи: например, отрицательный коагулазный стафилококк, Propionibacterium spp и другие.

Однако у пациентов с ослабленным иммунитетом нельзя пренебрегать никакими микроорганизмами, но в этом случае микроорганизм должен появиться в нескольких образцах.

С другой стороны, если чувствительность к антибиотикам одного и того же микроорганизма, выделенного в двух разных образцах, одинакова, инфекция реальна.

Другой характеристикой является бактериальная нагрузка, поскольку зараженные культуры крови растут поздно, в то время как реальные инфекции у нелеченных пациентов обычно положительны через 14 часов инкубации, когда микроорганизм не причиняет беспокойства.

С другой стороны, у пациентов, получающих противомикробные препараты, вовлеченному микроорганизму может потребоваться время, чтобы вырасти, потому что нагрузка очень мала.

Появление более чем одного микроорганизма может указывать на заражение, но если один и тот же результат повторяется в нескольких снимках с разных участков, то это реально.

Ссылки

1. «Культура крови». Википедия, свободная энциклопедия. 3 июля 2019, 17:28 UTC. 14 июл 2019, 19:05 en.wikipedia.org
2. Эрве Б. Новые технологии в микробиологической диагностике: автоматизация и некоторые применения в идентификации микробов и изучении чувствительности. Rev. Med. Clin. Графы. 2015; 26 (6) 753-763. Доступно на: reader.elsevier.com
3. Вильярроэль П. Глава 20: Сепсис и риск сердечно-сосудистых заболеваний. Сердечно-сосудистое здоровье. С. 187-194. Доступно на: fbbva.es
4. Санчес Р., Ринкон Б., Кортес С., Фернандес Э., Пенья С., Херас Э. М. Культуры крови: что вам сказали и что вы делаете? больной шарик. 2012; 11 (26): 146-163. Доступно на: scielo.isc
5. Пардинас-Ллерго М., Аларкон-Сотело А., Рамирес-Ангуло С., Родригес-Вебер Ф., Диас-Грин Э. Вероятность успеха получения положительного посева крови. Med. Interna Mex. 2017; 33 (1): 28-40. Доступно на: scielo.org